게놈 라이브러리는 어떻게 생산됩니까?

게놈 라이브러리는 특정 유기체의 총 염색체 DNA를 포함하는 두 가지 유형의 DNA 라이브러리 중 하나입니다. 게놈 라이브러리 내에서, 상이한 DNA 삽입물은 동일한 벡터 집단에 저장된다. 특정 유기체의 게놈 라이브러리를 준비하려면 게놈 DNA를 유기체로부터 분리해야합니다. 제한 효소는 특정 DNA 서열에서 게놈 DNA를 소화하여 게놈 DNA의 단편을 생성한다. 각 단편은 하나 또는 두 개의 유전자를 포함 할 수 있습니다. 이 단편은 특정 유형의 벡터에 삽입되고 DNA 클론을 준비하기 위해 숙주 박테리아로 변환된다. 

주요 영역이 적용됩니다

1. 게놈 라이브러리
- 정의, 사실
2. 게놈 라이브러리는 어떻게 생산됩니까
- 절차, 역가, 스크리닝

주요 용어 :게놈 라이브러리, 역가, 제한 소화, 스크리닝

게놈 라이브러리

게놈 라이브러리는 특정 유기체의 DNA의 전체 함량을 나타내는 일련의 DNA 클론입니다. DNA 클론은 미생물의 복제에 의해 전파된다. 게놈 라이브러리를 통해 연구원들은 연구를 위해 라이브러리에서 관심있는 DNA 조각을 분리 할 수 ​​있습니다. 게놈 라이브러리는 전체 게놈 시퀀싱에서 중요합니다.

게놈 라이브러리가 어떻게 생산됩니까

게놈 라이브러리 준비와 관련된 단계는 다음과 같습니다.

1. 게놈 DNA 추출 및 정제
2. 특정 제한 효소를 갖는 게놈 DNA의 소화-이것은 비슷한 크기의 DNA 단편 세트를 초래할 수 있습니다. 각 단편은 게놈의 하나 또는 두 개의 유전자를 포함 할 수 있습니다.
3. DNA 조각은 특정 유형의 벡터에 삽입됩니다. 벡터의 선택은 게놈의 크기에 의존한다. 벡터 용량은 다음과 같습니다.

표 1 :벡터 용량

4. 숙주로의 변형 - 숙주는 대부분의 경우 박테리아 또는 효모입니다. 특정 DNA 단편의 클론은 숙주의 복제 동안 형성됩니다.

그림 1 :게놈 라이브러리 준비

라이브러리의 역가 결정

라이브러리의 역가를 통해 연구원들은 샘플에 변환 된 숙주 셀 수를 이해할 수 있습니다. 형질 전환 된 세포를 희석하고 부피 당 세포 수를 계산하여 수행됩니다.

스크리닝 라이브러리

스크리닝은 라이브러리에서 특정 DNA 조각을 분리 할 수 ​​있습니다. 주로 재조합제의 직접 선택 또는 발현 검출에 의해 두 가지 방식으로 수행 될 수 있습니다. 직접 선택은 PCR 및 콜로니 혼성화에 의해 수행 될 수 있습니다.

결론

게놈 라이브러리는 특정 유기체의 게놈에서 전체 DNA 함량을 나타내는 DNA 단편의 모음입니다. 그것은 게놈의 단편화 된 DNA를 벡터에 삽입하고 재조합 분자를 곱하기를 위해 숙주 세포로 변환함으로써 생성된다.

참조 :

1. Kumar, Chinnu S.“게놈 도서관.”  LinkedIn Slideshare , 2015 년 10 월 4 일, 여기에서 사용할 수 있습니다.

이미지 제공 :

1. Aluquette의“Genomic Library Construction”-Commons Wikimedia를 통해 자신의 작업 (CC By-SA 3.0)

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