뮤신 겔 제조 :점액은 주로 겔 유사 네트워크를 형성하는 뮤신 당 단백질로 구성되어있다. 결합 상호 작용을 연구하기 위해, 뮤신 겔은 타액, 코 분비물 또는 장 점액과 같은 생물학적 공급원으로부터 뮤신을 추출하고 정제함으로써 제조 될 수있다.
시험 관내 결합 분석 :
평형 투석 :이 방법은 잠재적 인 바인더 (예를 들어, 약물 또는 단백질)를 포함하는 샘플을 투석 막에 배치하고 뮤신 또는 뮤신 겔을 함유하는 용액에 담그는 것을 포함한다. 시간이 지남에 따라, 바인더는 두 구획 사이에 평형을 이루고, 뮤신에 결합 된 양을 정량화 할 수있다.
SPR (Surface Plasmon Resonance) :SPR은 생체 분자 상호 작용을 실시간으로 모니터링 할 수있는 기술입니다. 그것은 뮤신 층 또는 뮤신-기능화 된 표면으로 코팅 된 얇은 금속 필름을 사용한다. 뮤신 표면에 분자의 결합은 굴절률의 변화로서 검출되어 결합 동역학 및 친화력에 대한 정보를 제공 할 수있다.
등온 적정 열량 측정 (ITC) :ITC는 분자 상호 작용과 관련된 열 변화를 측정합니다. 결합 공정 동안 방출되거나 흡수 된 열을 측정함으로써 분자와 뮤신 사이의 결합 친화도를 정량화하는데 사용될 수있다.
풀다운 분석 :풀다운 분석은 자기 비드 또는 마이크로 테이터 플레이트와 같은 고체 지지대에 뮤신 또는 뮤신 함유 샘플을 고정시키는 것을 포함한다. 이어서, 시험 분자는 고정화 된 뮤신과 함께 배양하여 결합 할 수있게한다. 무시 무너진 분자를 씻은 후, 결합 된 분자는 용리되고 분석된다.
세포 및 조직 기반 분석 :
점액 생성 세포주 :잔 세포 또는기도 상피 세포와 같은 뮤신을 생성하는 배양 된 세포주는 결합 상호 작용을 연구하는데 사용될 수있다. 세포는 잠재적 인 결합제로 처리 될 수 있고, 결합은 면역 세포 화학, 유세포 분석법 또는 다른 분석 기술에 의해 평가 될 수있다.
생체 내 조직 모델 :기관 또는 비강 조직 외식 편과 점액 분비 조직은보다 생리적으로 관련된 환경에서의 결합을 조사하는 데 사용될 수 있습니다. 조직은 결합제에 노출 될 수 있으며, 결합은 현미경 또는 다른 이미징 기술을 사용하여 시각화 및 정량화 될 수있다.
생체 내 동물 모델 :동물 모델은 살아있는 유기체에서 점액 층 내의 바인더 분포, 국소화 및 결합을 연구하기 위해 사용될 수있다. intravital 영상 또는 조직 수집과 같은 기술은 생체 내 결합을 평가하는 데 사용될 수 있습니다.
계산 방법 :
분자 도킹 :계산 도킹 시뮬레이션은 분자의 결합 포즈 및 뮤신 또는 뮤신 유사 구조를 예측할 수 있습니다. 분자 도킹 소프트웨어를 사용하여 연구원들은 원자 수준에서 결합의 분자 메커니즘에 대한 통찰력을 얻을 수 있습니다.
분자 역학 시뮬레이션 :이러한 시뮬레이션은 시간이 지남에 따라 바인더-메신 복합체의 역학 및 안정성에 대한 자세한 정보를 제공 할 수 있습니다. 역동적 인 환경에서 상호 작용을 시뮬레이션함으로써 연구자들은 결합시 발생하는 형태 적 변화와 상호 작용을 연구 할 수 있습니다.
실험 및 계산 접근법을 결합하면 점액에 결합하는 것에 대한 포괄적 인 이해가 제공 될 수 있습니다. 이러한 기술은 잠재적 결합제를 식별하고, 결합 특성을 특성화하며, 상호 작용의 기본 분자 메커니즘에 대한 통찰력을 얻는 데 도움이됩니다.
