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과학자는 왜 DNA를 분리하도록 겔을 준비 할 때 더 높은 아가 로스 용액을 사용합니까?

젤에서 아가 로스의 비율은 기공 크기를 결정합니다. . 이 기공 크기는 DNA 단편이 전기 영동에 의해 분리되는 방식에 직접적인 영향을 미칩니다. 과학자가 더 높거나 낮은 비율을 선택할 수있는 이유는 다음과 같습니다.

아가 로스 비율 (예 :1-2%) :

* 작은 기공 크기 : 이것은 작은 DNA 단편을 더 잘 분리 할 수있게한다 . 겔은 체처럼 작용하여 더 작은 조각을 더 오래 포획하여 더 천천히 마이그레이션 할 수 있습니다.

* 사용 :

* 1000베이스 쌍 미만 DNA 단편 분석 (BP)

* 작은 조각의 고해상도 분리

* 제한 조각 길이 다형성 (RFLP) 분석

아가 로스 (예 :0.5-0.8%) :

* 더 큰 기공 크기 : 이것은 더 큰 DNA 단편의 더 빠른 이동을 허용한다 .

* 사용 :

* 더 큰 DNA 단편 분리 (1000 bp 이상)

* 게놈 DNA 분석

* 매우 큰 DNA 분자에 대한 펄스 필드 젤 전기 영동 (PFGE)

주요 고려 사항 :

* 조각 크기 : 분리하려는 DNA 조각의 크기는 겔 백분율을 결정하는 주요 요인입니다.

* 해상도 : 높은 백분율 겔은 작은 조각을 분리하기 위해 더 높은 해상도를 제공하는 반면, 더 낮은 백분율 겔은 큰 조각을 분리하는 데 더 좋습니다.

* 마이그레이션 시간 : 높은 백분율 겔은 마이그레이션을 늦추므로 더 긴 달리기 시간이 필요합니다. 낮은 백분율 겔은 더 빠른 마이그레이션을 허용합니다.

예 :

500 내지 1000 bp 범위의 단편을 함유 한 제한 효소 다이제스트의 생성물을 분석하는 경우 1% 아가 로스 겔을 선택할 수 있습니다. 50,000 ~ 100,000 bp 범위의 단편으로 게놈 DNA를 분석하는 경우 0.7% 아가 로스 겔이 더 적합합니다.

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