매개 변수 :
동물 세포 배양은 복잡하고 섬세한 과정으로, 최적의 성장을 위해 여러 매개 변수를 신중하게 제어해야합니다. 이것들은 다음과 같이 광범위하게 분류 할 수 있습니다.
1. 물리적 매개 변수 :
* 온도 : 대부분의 포유 동물 세포주는 37 ℃에서 번성한다. 이것은 최적의 효소 활성 및 세포 과정에 중요합니다.
* pH : 세포는 일반적으로 7.2와 7.4 사이의 약간 알칼리성 환경이 필요합니다. 이것은 미디어에서 버퍼를 사용하여 유지됩니다.
* 습도 : 증발을 방지하고 올바른 매체 부피를 유지하려면 높은 습도 (일반적으로 약 95%)가 필수적입니다.
* 가스 조성 : 세포는 호흡을 위해 산소가 필요하고 pH를 유지하려면 CO2가 필요합니다. 이것은 일반적으로 5% CO2로 가습 인큐베이터에서 세포를 배양함으로써 제공됩니다.
* 표면적 : 세포는 부착 및 성장을 위해 충분한 표면적이 필요합니다. 이것은 플라스크, 다중 웰 플레이트 또는 마이크로 캐리어와 같은 다양한 방법을 통해 달성됩니다.
2. 미디어 구성 :
* 기본 영양소 : 배지에는 세포 성장 및 신진 대사를 지원하기 위해 아미노산, 비타민, 포도당 및 소금과 같은 필수 영양소가 포함되어야합니다.
* 성장 인자 : 일부 세포 유형은 증식을 자극하기 위해 인슐린 또는 표피 성장 인자 (EGF)와 같은 특정 성장 인자가 필요합니다.
* 혈청 : 혈청은 종종 미디어에 첨가되어 필수 영양소 및 성장 인자뿐만 아니라 부착 및 보호를위한 단백질을 제공합니다. 그러나 혈청은 복잡하고 정의되지 않은 혼합물로 변동성 및 잠재적 오염 물질을 도입 할 수 있습니다.
* 버퍼 : 중탄산염 또는 HEPE와 같은 완충제는 pH 안정성을 유지하는 데 사용됩니다.
* 항생제 : 항생제는 때때로 박테리아 오염을 방지하기 위해 첨가되지만 세포 성장에도 영향을 줄 수 있으며주의해서 사용해야합니다.
* 기타 첨가제 : 세포주 및 적용에 따라 킬레이트 제 또는 항산화 제와 같은 다른 첨가제가 필요할 수 있습니다.
3. 세포주 특이 적 요인 :
* 통과 번호 : 세포는 유한 수명을 가지며 통과 수가 증가함에 따라 성장 특성이 변합니다.
* 하위 문화 빈도 : 세포를 분할하는 빈도 (하위 배양)는 세포주와 그 성장률에 따라 다릅니다.
* 시드 밀도 : 배양 용기에 시드 된 초기 세포의 수는 성장 및 세포 형태에 영향을 미칩니다.
* 스트레스 요인 : 세포는 과밀, 영양소 고갈 또는 PH 변동과 같은 인자에 의해 강조 될 수 있으며, 이는 성장에 부정적인 영향을 줄 수 있습니다.
4. 무균 기술 :
* 무균 : 박테리아, 곰팡이 또는 바이러스의 오염을 방지하기 위해 멸균 환경을 유지하는 것이 중요합니다. 여기에는 멸균 장비 및 절차를 사용하는 것이 포함됩니다.
* 오염 방지 : 오염에 대한 정기적 인 모니터링 및 적절한 멸균 기술 사용은 성공적인 세포 배양에 필수적입니다.
5. 장비 :
* 인큐베이터 : 올바른 온도 및 가스 조성을 유지하는 가습 인큐베이터.
* 세포 배양 후드 : 층류 후드는 셀을 취급하기위한 멸균 환경을 제공합니다.
* 현미경 : 현미경은 세포 형태를 시각화하고 성장을 평가하는 데 필수적입니다.
* 피펫 및 멸균 용기 : 이들은 세포 배양 배지 및 세포를 처리하고 전달하는 데 필요합니다.
이러한 모든 매개 변수를 신중하게 제어함으로써 동물성 세포 배양을위한 최적의 환경을 만들어 효율적인 성장과 성공적인 실험을 가능하게 할 수 있습니다. 그러나 각 세포주에는 고유 한 요구 사항과 민감도가있어 최적의 성장을위한 추가 최적화 및 전문 프로토콜이 필요합니다.
