1. 변형 :
* 메커니즘 : 이것은 박테리아가 환경에서 벌거 벗은 DNA를 섭취 할 수있는 자연스러운 과정입니다.
* 절차 :
* 박테리아는 화학 물질 (염화 칼슘과 같은) 또는 간단한 전기 충격 (전기 천공)으로 처리되어 세포벽을 더욱 투과 할 수 있도록합니다.
* 원하는 유전자 (종종 플라스미드로 클로닝)를 박테리아에 첨가합니다.
* 일부 박테리아는 DNA를 사용하여 자신의 게놈에 포함 시키거나 별도의 플라스미드로 유지합니다.
* 장점 : 간단하고 비교적 저렴합니다.
* 단점 : 모든 박테리아가 자연적으로 유능한 것은 아닙니다 (DNA를 복용 할 수 있음).
2. 변환 :
* 메커니즘 : 박테리오파지 (박테리아를 감염시키는 바이러스)는 벡터로서 작용하여 박테리아 DNA를 한 세포에서 다른 세포로 운반한다.
* 절차 :
* 파지는 공여자 박테리아를 감염시켜 공여자의 DNA 조각을 집어 들었습니다.
* 그런 다음 파지는 수용자 박테리아를 감염시켜 획득 한 DNA를 옮깁니다.
* 장점 : 특정 유전자 전달에 매우 효율적입니다.
* 단점 : 각 박테리아 종에 대한 특수한 파지가 필요합니다.
3. 컨쥬 게이션 :
* 메커니즘 : 물리적 연결 (Pilus)을 통해 한 박테리아에서 다른 박테리아로 DNA를 직접 전달합니다.
* 절차 :
* 기증자 박테리아는 수령 된 박테리아와 연결되어 필러스를 형성 할 수있는 생식 인자 (F 인자)를 가지고 있습니다.
* F 인자는 박테리아 염색체에 통합되어 염색체 유전자의 전이를 허용 할 수있다.
* 장점 : 큰 DNA 단편을 전달할 수 있습니다.
* 단점 : 특수 장비 및 기술이 필요합니다.
4. 인공 변환 방법 :
* 전기 천공 : 간단한 전기 펄스는 세포막에 기공을 생성하여 DNA가 들어갈 수있게한다.
* 미세 주입 : DNA는 미세 바늘을 사용하여 박테리아 세포에 직접 주사됩니다.
* 리포좀-매개 전달 : DNA는 박테리아 세포막과 융합하여 DNA를 내부에 전달하는 리포좀 (지질 소포)에 캡슐화된다.
중요한 고려 사항 :
* 벡터 선택 : 적절한 벡터 (플라스미드, 파지 또는 기타)를 선택하는 것은 유전자의 크기, 숙주 박테리아 및 원하는 결과에 따라 다릅니다.
* 선택 마커 : 항생제 또는 다른 선택 가능한 특성에 대한 내성을 제공하는 유전자는 종종 변형되지 않은 박테리아를 변형되지 않은 박테리아와 구별하기 위해 벡터에 통합됩니다.
* 유전자 발현 : 전달 후, 도입 된 유전자는 수용자 박테리아에서 발현되어야한다. 이를 위해서는 종종 벡터에 규제 요소 (프로모터, 터미네이터)가 존재해야합니다.
이러한 DNA 기술 방법은 유전자 공학, 연구 및 생명 공학을위한 중요한 도구입니다. 그들은 우리가 박테리아 기능을 이해하고, 새로운 약물을 개발하며, 바람직한 특성을 가진 유기체를 만들 수 있습니다.
