구성 요소 이해 :
* 효소 공란 : 여기에는 기판을 제외한 모든 것이 포함됩니다. 그것의 목적은 효소-하류 반응으로 인한 것이 아닌 배경 활동 또는 흡광도를 설명하는 것입니다. 여기에는 다음이 포함될 수 있습니다.
* 효소 자동 활동 : 일부 효소는 특정 기질이없는 경우에도 약간의 활성을 가질 수 있습니다.
* 비 효소 반응 : 반응 믹스의 버퍼 용액 자체 또는 기타 성분은 흡광도 변화에 기여할 수 있습니다.
* 기판 : 이것은 효소가 생성물을 생산하기 위해 작용하는 분자입니다.
* 결합 솔루션 : 여기에는 효소와 기질이 모두 포함됩니다.
별도의 솔루션이 중요한 이유 :
1. 특정 반응의 정확한 측정 : 별도의 블랭크와 기판을 사용하면 효소가 특정 기질과의 상호 작용으로 인해 활성을 분리하고 측정 할 수 있습니다. 결합 된 솔루션에서 측정 된 총 활동에서 블랭크에서 측정 된 배경 활동을 빼낼 수 있습니다.
2. 간섭 제거 : 효소와 기질을 미리 혼합하면 다음으로 이어질 수 있습니다.
* 조기 제품 형성 : 효소는 실험이 시작되기 전에 기질에서 작용하기 시작하여 부정확 한 결과를 초래할 수 있습니다.
* 효소 분해 : 효소가 장기간 기질과 사전 혼합되면 불안정하거나 비활성화 될 수 있습니다.
3. 반응 시작에 대한 제어 : 효소와 기질을 별도로 첨가함으로써, 우리는 반응이 시작되는 정확한 순간을 제어 할 수있다. 이것은 반응의 동역학을 연구하는 데 필수적입니다 (얼마나 빨리 진행되는지).
예 :
유색 기질을 분해하는 효소의 활성을 측정한다고 상상해보십시오. 효소와 기질을 결합하면 색상 변화가 즉시 시작될 수있어 반응의 실제 속도를 결정하기가 어려워집니다. 공란을 사용하여 초기 색상을 설명하고 기질에 대한 효소의 작용으로 인해 특히 색상 변화를 측정하는 것이 더 정확한 결과를 제공합니다.
요약 :
효소 블랭크 및 기질을 별도로 사용하는 것은 정확하고 신뢰할 수있는 효소 활성 측정에 중요합니다. 이 방법은 기질에 대한 효소의 특정 활성 만 측정하여 간섭을 제거하고 제어 된 반응 개시를 허용합니다.
