다음은 프로세스의 고장입니다.
1. 유전자의 분리 :
* 원하는 유전자는 제한 효소를 사용하여 공여체 유기체의 DNA로부터 확인되고 분리된다. 이들 효소는 특정 서열에서 DNA를 절단하여 관심있는 유전자를 방출한다.
2. 벡터 구조 :
* 벡터 (종종 플라스미드 또는 바이러스)는 유전자를 수용자 유기체로 운반하기 위해 선택됩니다.
* 분리 된 유전자는 Ligase 효소를 사용하여 벡터에 삽입되어 DNA 가닥을 함께 밀봉합니다.
3. 변형 :
* 유전자를 함유하는 벡터는 수용자 유기체 (숙주 세포)에 도입된다. 이것은 다음을 포함한 다양한 방법을 통해 수행 할 수 있습니다.
* 전기 천공 : 전기 펄스를 적용하여 셀 막에 임시 기공을 생성하여 벡터가 들어가도록합니다.
* 형질 감염 : 화학 물질 또는 바이러스를 사용하여 벡터를 세포로 전달합니다.
* 미세 주입 : 벡터를 셀에 직접 물리적으로 주입합니다.
4. 선택 및 선별 :
* 유전자를 성공적으로 복용 한 세포 만 선택됩니다. 이것은 항생제 내성 마커 또는 다른 선택 메커니즘을 사용하여 달성 할 수 있습니다.
*이어서 형질 전환 된 세포를 스크리닝하여 유전자가 숙주 게놈에 올바르게 혼입되었고 기능적임을 확인한다.
5. 유전자 발현 :
* 일단 유전자가 숙주 세포의 게놈에 통합되면, 원하는 단백질의 생산을 초래할 수있다.
유전자 클로닝의 적용 :
* 치료 단백질의 생산 : 인슐린, 성장 호르몬 및 기타 중요한 단백질에 대한 클로닝 유전자.
* 유전자 요법 : 유전 적 장애가있는 환자에서 결함이있는 유전자를 기능적 유전자로 대체합니다.
* 농업 생명 공학 : 해충 저항성, 제초제 내성 및 작물의 영양 함량 향상을위한 유전자를 도입합니다.
* 연구 개발 : 유전자 기능 및 조절 연구.
Gene Cloning은 의학, 농업 및 연구에서 광범위한 응용을 갖춘 강력한 도구입니다.
