진핵 세포 :
* 세포벽 : 진핵 생물 세포는 셀룰라아제 또는 펙 티나 제와 같은 효소를 사용하여 분해되어야하는 세포벽 (식물 및 곰팡이)을 가지고있다.
* 핵막 : DNA는 핵 내에서 붕괴되어야하는 막으로 밀폐된다. 이것은 종종 세제를 사용하여 막의 지질 이중층을 분해하는 것을 포함합니다.
* 염색질 구조 : DNA는 단백질 (히스톤)으로 크로 마틴으로 단단히 포장된다. 이것은 단백질을 소화하고 DNA를 방출하기 위해 Proteinase K와 같은 효소의 사용이 필요합니다.
박테리아 세포 :
* 세포벽 : 박테리아 세포벽은 강력하고 단단한 구조 인 펩티도 글리 칸으로 구성됩니다. 이것은 벽을 분해하기위한 다른 접근법이 필요합니다. 리소자임과 같은 효소 또는 세제 및 효소의 조합이 일반적으로 사용됩니다.
* 핵 없음 : 박테리아 DNA는 막-결합 핵으로 둘러싸여 있지 않습니다. 이것은 핵막이 없어서 과정을 단순화합니다.
* 원형 DNA : 박테리아 DNA는 단일 원형 염색체입니다. 이를 통해 분리하고 정화하기가 더 쉬워집니다.
여기에 비교 테이블이 있습니다 :
| 기능 | 진핵 세포 | 박테리아 세포 |
| ------------------------ | ---------------------------------------------------------------------------------- |
| 세포벽 | 셀룰로오스 (식물), 키틴 (곰팡이) | Peptidoglycan |
| 핵막 | 현재 | 결석 |
| DNA 구조 | 크로 마틴에 포장 된 선형 | 원형, 염색질 없음 |
| DNA 추출 방법 | 기계적 파괴, 효소, 세제 | 효소, 세제 |
박테리아 DNA 추출의 특정 단계 :
1. 세포 용해 : 세포벽과 세포막을 분해하기 위해 효소 (Lysozyme)와 세제의 조합을 사용하십시오.
2. DNA 강수량 : 음으로 하전 된 DNA 분자를 중화시키기 위해 고농도의 염 (예를 들어, NACL)을 첨가하십시오. 이로 인해 용해성이 떨어지고 용액에서 침전 될 수 있습니다.
3. DNA 분리 : 원심 분리에 의해 DNA를 나머지 세포 파편에서 분리하십시오. DNA는 튜브 바닥에 펠렛을 형성합니다.
4. DNA 세척 및 정제 : 남은 불순물을 제거하기 위해 에탄올과 같은 용액으로 DNA 펠렛을 세척하십시오. DNA는 컬럼 기반 접근법을 사용하여 추가로 정제 될 수 있습니다.
중요한 메모 :
* 박테리아 DNA 추출에 사용되는 특정 방법 및 시약은 박테리아 종과 추출의 목적에 따라 달라질 수 있습니다.
* 공정을 단순화하고 다른 박테리아 종에 대한 사전 최적화 된 시약을 제공하는 시판되는 키트가 있습니다.
