1. DNA의 분리 :
* 공급원 유기체 (관심 유전자를 함유 함)와 숙주 유기체 (유전자가 삽입 될)로부터의 DNA가 분리된다.
2. 제한 효소로 DNA 절단 :
* 제한 효소 특정 인식 사이트에서 DNA를 자르고 "끈적 끈적한 끝"(짧은 단일 가닥 돌출부)로 조각을 만듭니다. 이것은 소스 DNA와 숙주 DNA 사이의 보완 적 기본 쌍을 허용한다.
3. 벡터에 DNA를 삽입 :
* a 벡터 (일반적으로 플라스미드 또는 바이러스)는 관심 유전자를 숙주 유기체에 운반하는 데 사용됩니다. 벡터는 또한 소스 DNA와 동일한 제한 효소로 절단되어 호환 끈적 끈적한 끝을 만듭니다.
* 관심 유전자가 벡터에 삽입되고 끝은 DNA 리가 제 에 의해 함께 결합됩니다. , DNA 골격의 갭을 밀봉하는 효소.
4. 숙주 세포의 변형 :
* 재조합 벡터는 변환 라는 과정을 통해 숙주 유기체, 일반적으로 박테리아에 도입됩니다. . 이것은 박테리아 세포막을 벡터에 투과 할 수있게하는 것을 포함한다.
5. 선택 및 복제 :
* 재조합 벡터를 성공적으로 취한 세포만이 관심 유전자를 발현합니다. 이들 세포는 배양에서 선택되고 성장하여 재조합 DNA의 복제를 허용한다.
요약하면, 재조합 DNA의 형성은 다음과 같은 주요 요인으로부터 비롯됩니다.
* 제한 효소 : 이들 효소는 특정 서열에서 DNA를 절단하여 외래 DNA를 벡터에 삽입 할 수있게한다.
* 벡터 : 이들은 관심있는 유전자를 숙주 유기체에 가지고있다.
* DNA 리가 제 : 이 효소는 삽입 된 유전자와 벡터 DNA 사이의 갭을 밀봉합니다.
* 변형 : 이 과정을 통해 재조합 벡터가 숙주 셀에 들어갈 수 있습니다.
재조합 DNA를 만드는이 과정을 통해 과학자들은 새로운 유전자를 유기체에 도입하여 의학, 농업 및 산업에 다양한 적용을 초래할 수 있습니다.
