1. 샘플 준비 :
* 샘플을 얻으십시오 : 관찰하려는 박테리아가 들어있는 샘플을 수집하십시오. 이것은 문화, 면봉 또는 생물학적 체액에서 나올 수 있습니다.
* 젖은 마운트 준비 :
* 청소 슬라이드 : 깨끗한 유리 현미경 슬라이드와 덮개 슬립을 사용하십시오.
* 샘플 추가 : 박테리아 현탁액 또는 배양의 작은 방울을 슬라이드의 중앙에 놓습니다.
* 액체를 추가 : 적합한 장착 매체 한 방울을 샘플에 추가하십시오. 이것은 다음과 같습니다.
* 물 : 간단한 관찰.
* 식염수 용액 : 박테리아 세포에 동위 원소 삼투 스트레스를 최소화합니다.
* 영양소 국물 : 박테리아 성장 및 분열을 관찰하기 위해.
* 커버 슬립 : 덮개 미끄러짐을 강하로 부드럽게 낮추어 기포가 갇히지 않도록합니다.
* 씰 (선택 사항) : 장기적인 관찰을 위해서는 피 커버 슬립의 가장자리를 석유 젤리 또는 매니큐어로 밀봉하여 증발을 방지 할 수 있습니다.
2. 현미경 설정 :
* Brightfield 현미경 : 이것은 살아있는 박테리아 관찰을위한 가장 일반적인 유형입니다.
* 목표 렌즈 : 고출력 목표 렌즈 (40x 또는 100x)를 선택하십시오.
* 응축기 : 최적의 조명을 제공하도록 응축기를 조정하십시오.
* 광원 : 과열 및 박테리아의 손상을 방지하기 위해 광 강도를 조정하십시오.
3. 관찰 :
* 초점 : 샘플에 현미경을주의 깊게 집중하십시오.
* 관찰 : 형태 (모양), 크기 및 운동성 (운동)에 대한 박테리아를 검사하십시오.
* 초점 조정 : 박테리아의 다른 평면을 명확하게 볼 수 있도록 미세 초점을 조정해야 할 수도 있습니다.
4. 고려 사항 :
* 온도 제어 : 박테리아 성장에 적합한 온도에서 현미경 단계를 유지하십시오.
* 산소 수준 : 호기성 박테리아에 대한 적절한 산소화를 보장하십시오.
* 기간 : 스트레스와 세포 사멸을 최소화하기 위해 짧은 기간 동안 박테리아를 관찰하십시오.
* 특수 기술 : 특정 응용 프로그램의 경우 다음을 사용할 수 있습니다.
* 위상 대비 현미경 : 묵상 된 박테리아를 볼 때 대비를 향상시킵니다.
* Darkfield 현미경 : 어두운 배경에 대한 박테리아를 강조합니다.
* 형광 현미경 : 형광 표지 된 박테리아를 시각화 할 수 있습니다.
5. 안전 예방 조치 :
* 장갑 : 박테리아 샘플을 취급 할 때 장갑을 착용하여 오염을 방지하십시오.
* 소독제 : 사용 후 현미경과 모든 장비를 소독제로 철저히 청소하십시오.
* 폐기 : 실험실 안전 지침에 따라 중고 슬라이드 및 샘플을 올바르게 폐기하십시오.
중요한 메모 :
* 문화 매체 : 문화에서 박테리아를 관찰하는 경우 미디어가 성장에 적합하고 문화가 적절한 성장 단계 (예 :로그 단계)에 있는지 확인하십시오.
* 염색 : 염색은 일반적으로 고정 박테리아에 사용되지만 일부 얼룩은 살아있는 박테리아와 함께 사용할 수 있습니다. 그러나 이러한 얼룩은 박테리아 운동성에 영향을 줄 수 있으며 모든 응용 분야에 적합하지 않을 수 있습니다.
기억하십시오 : 살아있는 박테리아의 현미경 검사는 관찰과 박테리아의 생존력 유지 사이의 신중한 균형이 필요합니다. 이 지침을 따르면 고품질 이미지를 얻고 살아있는 박테리아의 역동적 인 세계를 이해할 수있는 기회를 향상시킬 수 있습니다.
