MTT와 MTS 분석의 차이점은 무엇입니까?

mtt 및 mts assay는 세포 생존력을 측정하는 데 사용되는 두 가지 유형의 분석법 입니다. . 그들은 세포 증식 및 세포 독성에 대한 시험 분자가 세포 생존력에 영향을 미치는 효과를 밝히는 데 도움이된다. 또한, MTT 분석은 MTS 분석보다 시간이 더 소비됩니다.

주요 영역을 다루었습니다

1. MTT 분석
- 정의, 프로세스, 중요성
2. MTS Assay
- 정의, 프로세스, 중요성
3. MTT와 MTS 분석 의 유사점은 무엇입니까?
- 일반적인 기능의 개요
4. MTT와 MTS 분석 의 차이점은 무엇입니까?
- 주요 차이점 비교

주요 용어

세포 증식, 세포 생존력, 세포 독성, MTS 분석, MTT 분석

mtt assay

MTT 분석은 고역 처리 스크리닝 (HTS)에 적합한 96- 웰 형식에 대해 개발 된 최초의 균질 세포 생존력 분석입니다. 이 분석의 원리는 생존 세포에 존재하는 효소 NAD (P) H- 의존성 세포 산화 구체 효소의 작용에 의해 테트라 졸륨 염료를 감소시키는 세포의 능력에 기초한 세포 생존력을 결정하는 것이다. 여기서, MTT 분석에 사용 된 테트라 졸륨 염료는 3- (4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일) -2,5- 디 페닐 테트라 졸륨 브로마이드이며, 이는 황색이다. 상기 언급 된 효소 작용은 세포 내부 및 세포 표면 근처 및 배양 배지 근처에 침전 된 결정의 형태로 불용성 포르 마잔 생성물의 형성을 초래한다. 그러나, 포르 마잔 생성물의 양은 흡광도를 측정하여 측정되므로, 불용성 결정은 먼저 가용화되고 흡광도는 570 nm에서 측정 될 수있다.

그림 1 :MTT 반응

그러나 MTT 분석은 더 적은 재료와 단계를 사용하지만이 방법에는 몇 가지 단점이 있습니다. 분석은 세포를 현탁시키는 데 적합하지 않다. 또한, 샘플에 존재하는 침전 된 단백질 및 세포 파편은 흡광도 측정을 방해하여 민감도와 분석의 정확성을 감소시킬 수 있습니다. 또한, 분석 시간과 샘플에 존재하는 세포 수는 각 세포 유형에 대해 최적화되어야합니다.

mts assay

MTS 분석은 새로운 유형의 테트라 졸륨 염료를 사용하기 때문에 MTT 분석을위한 새로운 방법으로, 궁극적으로 수성, 가용성이있는 포르 마만 제품을 초래합니다. 여기서, MTS 분석에 사용 된 테트라 졸륨 염료는 3- (4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일) -5- (3- 카르복시 메 톡시 페닐) -2- (4- 쿨 포 페닐) -2H- 테트라 졸륨이다. 가용성 포르 마잔 염료의 형성은 페나진 메토 설페이트 (PMS)의 존재하에 발생하며, 이는 중간 전자 수용체로서 작용하여 NADH로부터 전자를 테트라 졸륨 염료를 감소시키고 가용성 포름 곱을 형성한다.

그림 2 :MTT 플레이트

가용성 포르 마잔 제품의 직접 형성은 MTT 분석의 포르 마잔 제품 가용화 단계를 감소시킵니다. 따라서, MTS 분석은 더 효율적이고 시간 소모가 적다. 또한, 세포 손실과 같은 잠재적 오류를 제거하는데, 이는 배지를 제거하고 포르 마잔 생성물을 가용화하는 동안 발생할 수 있습니다. 또한, 결과적인 포르 마잔 제품은 색이 어둡다; 이것은 분석의 감도와 정확성을 증가시킵니다.

MTT와 MTS 분석 간의 유사성

• MTT 및 MTS 분석은 시험 관내에서 세포 생존력을 결정하는 두 가지 유형의 분석이다.
• 두 분석법 모두 세포 증식 및 세포 독성에 대한 시험 분자의 효과를 평가하는 데 도움이됩니다.
• 또한 둘 다 비색 분석법입니다.
• 또한, 그들은 테트라 졸륨 염료를 포르 마잔으로 줄이는 세포의 능력에 기초하여 세포의 대사 활동을 평가한다.
• 또한, 위의 감소를 담당하는 효소는 NAD (P) H 의존적 세포 산화 옥시 덕 타제이며, 이는 생존 세포에 존재합니다.
• 또한 감소 반응은 원형질 막 전자 수송에 의해 세포 외부에서 발생합니다.
• MTT 시약은 밝은 민감성입니다. 따라서 이러한 분석법은 어두운 곳에서 수행되어야합니다.
• 두 분석에 대한 인큐베이션 시간은 테트라 졸륨 염료를 첨가 한 후 동일하며 37 ° C에서 1 ~ 4 시간입니다.

MTT와 MTS 분석 간의 차이

정의

mtt assay는 비색 assay 을 나타냅니다 MTS 분석은 세포 대사 활성을 평가하는 동안 MTT 분석에 필요한 간헐적 단계없이 시약을 세포 배양에 똑바로 첨가하는 편의성을 제공하는 '1 단계'MTT 분석을 지칭합니다. 따라서 이것은 MTT와 MTS 분석의 주요 차이점입니다.

분석에 사용 된 테트라 졸륨 염료의 유형

또한, MTT 분석은 MTT (3- (4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일) -2,5- 디 페닐 테트라 졸륨 브로마이드)를 사용하지만, MTS 분석은 MTS를 사용합니다. (3- (4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일) -5- (3- 카르복시 메 톡시 페닐) -2- (4- 설포 페닐) -2H- 테트라 졸륨).

포르 마잔 제품의 용해도

또한 MTT 분석의 포르 마잔 제품은 불용성이고 MTS 분석의 포르 마잔 제품은 용해됩니다. 따라서 이것은 MTT와 MTS 분석 간의 중요한 차이입니다.

흡수 측정

흡광도는 MTT 분석에서 570 nm로 측정되는 동안 흡광도는 490 nm에서 측정됩니다.

시간

시간은 MTT와 MTS 분석의 차이도 있습니다. MTS 분석법은 MTT 분석보다 시간 소모성이 적습니다.

감도와 정확도

게다가, MTT 분석은 세포 파편과 침전 된 단백질이 흡광도 측정을 방해 할 수 있고 MTS 분석법은 어두운 포르 마만 생성물의 형성으로 인해 더 민감하고 정확합니다.

비용

MTT와 MTS 분석의 또 다른 차이점은 비용입니다. MTT 분석은 MTS 분석보다 저렴합니다.

결론

MTT 분석은 세포 증식 및 세포 독성에 대한 시험 분자의 효과를 평가하기위한 세포 생존력을 측정하기위한 고전적인 분석법이다. 그러나, MTT 분석에서 생성 된 포르 마잔 생성물은 불용성이다. 따라서,이 분석은 포르 마잔 생성물을 가용화하기위한 추가 단계가 필요하다. 대조적으로, MTS 분석은 세포 생존력을 측정하는 새로운 방법이며, 새로운 종류의 테트라 졸륨 염을 사용하여 가용성 포르 마잔을 생성하여 MTT 분석 절차의 한 단계를 줄입니다. 따라서, MTS 분석은 MTT 분석과 비교할 때 더 효율적이다. 따라서 MTT와 MTS 분석의 주요 차이점은 포르 마잔 제품의 특성입니다.

참조 :

1. Riss TL, Moravec RA, Niles AL 등 세포 생존력 분석. 2013 년 5 월 1 일 [2016 년 7 월 업데이트]. 에서 :Sittampalam GS, Coussens NP, Brimacombe K 등, 편집자. 분석 지침 매뉴얼 [인터넷]. BETHESDA (MD) :Eli Lilly &Company 및 전국 번역 과학 센터; 2004-. 여기에서 사용할 수 있습니다.

이미지 제공 :

1. Rogan Grant의“MTT Reaction”-Commons Wikimedia
2를 통한 자신의 작업 (CC By-SA 4.0). Shinryuu의 "MTT Plate" - Commons Wikimedia를 통한 자신의 작업 (공개 도메인)