재조합 DNA는 둘 이상의 종의 DNA를 결합하여 생성 된 인공 유형의 DNA입니다. 재조합 DNA를 만드는 과정은 분자 클로닝으로 알려져 있습니다. 분자 클로닝의 기본 절차에는 분리 DNA, 절단 DNA, DNA 결합 및 재조합 DNA를 증폭시키는 것이 포함됩니다. 관심 유전자는 벡터에 삽입되며, 이는 관심 유전자를위한 캐리어 분자 역할을한다. 관심 유전자와 함께 벡터는 재조합 DNA로 지칭된다. 유전자 클로닝에서 제한 효소의 주요 역할은 DNA 절단입니다. DNA 조작에 적합한 제한 효소의 주요 특징은 특정 표적에서 DNA를 자른다는 것입니다. 이것은 결합 목적을 위해 원하는 DNA 단편의 생성을 허용합니다.
주요 영역이 적용됩니다
1. 제한 효소는 무엇입니까
- 정의, 속성, 역할
2. 재조합 DNA를 만드는 데 제한 효소가 어떻게 사용됩니까?
- 유전자 클로닝, 유전자 클로닝에서 제한 효소 사용
주요 용어 :DNA 절단, 유전자 클로닝, 관심 유전자, 분자 클로닝, 재조합 DNA 기술, 제한 효소, 벡터
제한 효소는 무엇입니까
제한 효소는 제한 부위로 알려진 짧고 특정한 DNA 서열을 인식하고 해당 부위에서 DNA를 절단하는 엔도 뉴 클레아 제입니다. 그들은 박테리아에 의해 생성 된 생화학 가위의 한 유형입니다. 제한 효소는 박테리아로부터 박테리아를 방어합니다. 이 효소는 박테리아에서 분리되며 실험실에서 DNA를 자르는 데 사용됩니다. 제한 효소의 작용은 그림 1에 나와 있습니다.
그림 1 :힌디의 행동
정확한 위치에서 DNA를 자르는 제한 효소의 능력은 연구자들이 게놈 DNA로부터 유전자 함유 단편을 분리 할 수있게한다. 이들 단편은 벡터에 삽입되어 재조합 DNA 분자를 생성 할 수있다.
재조합 DNA를 만드는 데 사용되는 제한 효소는 어떻게 사용됩니까
재조합 DNA는 둘 이상의 종의 DNA로 구성된 DNA 분자입니다. 주로 공여자 종과 관심 유전자를 숙주 세포에 전달하는 벡터로부터의 관심 유전자를 포함한다. 재조합 DNA 분자의 생성의 주요 단계는 DNA 분리, 제한 효소에 의한 소화, 벡터에 대한 관심 유전자의 결찰 및 숙주 세포 내부의 재조합 DNA 분자를 증폭시키는 DNA 분리이다. 전체 과정은 분자 클로닝 로 알려져 있습니다 . 분자 클로닝은도 2 에 도시되어있다 .
그림 2 :분자 클로닝
관심 유전자는 먼저 게놈 DNA 형태로 생물학적 샘플로부터 분리되거나 PCR에 의해 증폭 될 수 있습니다. 때로는 관심 유전자가 벡터 내에 존재할 수 있습니다. 관심 유전자를 숙주 세포에 운반하기에 적합한 벡터에 삽입하려면 모자 분자에서 차단해야합니다. 제한 효소가 제한 부위를 인식하여 DNA를 정확하게 절단함에 따라,이 목적으로 사용될 수 있습니다. 관심 유전자 및 벡터는 동일한 제한 효소로 소화 될 수 있거나, 관심 유전자의 각 끝은 2 개의 제한 효소에 의해 소화 될 수있다. 이 소화는 벡터에 대한 관심 유전자의 결찰에 호환되는 끝을 생성합니다. 두 개의 제한 효소를 갖는 소화는 원하는 방향에서 단편의 결찰을 허용합니다. 결찰 후, 생성 된 재조합 DNA 분자는 많은 수의 사본을 생산하기 위해 박테리아로 변환된다.
결론
제한 효소는 제한 부위라고하는 특정 위치에서 DNA를 자르는 엔도 뉴 클레아 제입니다. 제한 효소의 특성은 정확한 위치에서 DNA를 절단함으로써 재조합 DNA 분자를 생성하는데 사용될 수있다. 재조합 DNA는 일반적으로 벡터에 삽입 된 관심 유전자를 함유합니다.
참조 :
1.“제한 효소의 정의.” Medicinenet, 여기에서 구할 수 있습니다.
2. 그리피스, 앤서니 JF. "재조합 DNA 만들기." 유전자 분석 소개. 1970 년 1 월 1 일 미국 국립 의학 도서관 7 판.
이미지 제공 :
1. Helixitta의“Hindiii 제한 사이트 및 스티커 엔드 벡터”-Commons Wikimedia
2를 통한 OWN OUT (CC BY-SA 4.0). Joyxi의 "Construct" - Commons Wikimedia를 통한 자신의 작업 (공개 도메인)
