주요 차이 GFP와 EGFP 사이는 GFP (녹색 형광 단백질의 의미)가 청색광에 노출 될 때 밝은 녹색 형광을 나타내는 단백질 인 반면, EGFP (강화 된 녹색 형광 단백질의 경우)는 GFP보다 더 강한 형광을 나타낸다. 또한 GFP와 EGFP의 또 다른 중요한 차이점은 GFP가 해파리에서 분리 된 야생형 단백질, Aequorea Victoria 라는 것입니다. . 그러나 EGFP는 원래 야생형의 엔지니어링 변형입니다.
GFP와 EGFP는 내부 발색단 역할을하는 두 가지 유형의 단백질입니다. 그들은 색상을 나타내려면 액세서리 효소/기질, 보조 인자 또는 유전자 제품이 필요하지 않습니다. 따라서 둘 다 분자 생물학에서 유전자 발현의 리포터로 사용됩니다.
주요 영역을 다루었습니다
1. gfp
- 정의, 구조, 중요성
2. egfp
- 정의, 구조, 중요성
3. GFP와 EGFP의 유사점은 무엇입니까
- 공통 기능의 개요
4. GFP와 EGFP의 차이점은 무엇입니까
- 주요 차이점 비교
주요 용어
발색단, EGFP, GFP, 녹색 형광, 야생형 단백질
gfp
gfp (녹색 형광 단백질)는 파란색 또는 자외선에서 녹색을 빛나는 단백질입니다. 그것은 자연적으로 해파리, aequorea Victoria에서 발생합니다 . GFP는 238 개의 아미노산으로 구성됩니다. GFP의 크기는 26.9 kDa입니다. GFP는 보조 분자가없는 고유 형광으로 인해 분자 생물학의 강력한 도구입니다. 형광은 단백질의 연속 아미노산의 공유 재 배열 때문이다. 단백질의 폴딩 후, 주 사슬 원자, Ser65, Tyr66 및 Gly67은 고도로 접합 된 평면 P p 을 형성합니다. -Hydroxybenzylideneimidazolinone 발색단 O 2 . 결정 구조 연구에 따르면 분자의 β- 배럴 구조의 핵심 내에서 발색단의 포장은 상자성 산소, 수질 쌍극자 또는 시스-트랜스 이성질체 화를 통한이를 켄칭하지 않음을 보여준다. 또한, 이웃 분자와 발색단의 비공유 상호 작용은 스펙트럼 특성을 향상시킵니다.
그림 1 :GFP 및 형광 단의 리본 표현
gfp는 트랜스 제닉 변형 동안 유기체에 도입 될 수 있습니다. 또한 세대를 통해 유지 될 수도 있습니다. 야생형 GFP의 주요 단점은 37 ° C와 같은 생리 학적 온도에서 저 효율 폴딩으로 인한 세포 영상에서 단백질의 효과가 감소하여 형광 신호를 떨어 뜨리는 것입니다. 또한, 호스트 셀 내부의 GFP의 성숙 속도는 집계를 돌보는 동안 느린다. 2 개의 상이한 형태의 발색단의 존재로 인해 2 개의 여기 피크가 관찰 될 수있다. 그러나 단백질 공학은 야생형 GFP의 변형 형태를 도입하여 대부분의 문제를 해결했습니다.
egfp
eGFP (Enhanced Green Fluorescence Protein)는 GFP에 대한 강도 방출이 더 높은 야생형 GFP의 변형입니다. 최초이자 가장 중요한 GFP 변형 중 하나입니다. F64L 및 S65T의 두 돌연변이는 37 ℃에서 더 큰 폴딩 효율로 EGFP를 생성한다. 흥미롭게도, EGFP는 근처의 이온화 된 Glu222의 이온 상태를 조절하기 때문에 S65T에 의해 395 nm 피크의 억제로 인해 ~ 490 nm에서 단일 여기 피크를 갖는다. 한편, F64L은 37 ℃에서 접힘 효율을 증가시킨다. 중요하게도, EGFP의 코돈 서열은 포유 동물 세포에서의 발현에 최적화된다.
그림 2 :EGFP 표현
GFP와 EGFP 간의 유사성
- GFP와 EGFP는 푸른 빛에 노출 될 때 밝은 녹색 형광을 나타내는 단백질입니다.
- 둘 다 액세서리 효소/기질, 보조 인자 또는 유전자 제품없이 내부 발색단으로 작용할 수 있습니다.
- 그들은 구조의 코어를 통해 실행되는 나선을 함유하는 발색단과 함께 고전적인 β- 배럴 폴드를 형성한다.
- 그들은 분자 생물학에서 발현의 리포터로 사용됩니다.
GFP와 EGFP의 차이
정의
gfp : 파란색 또는 UV 광 하에서 녹색 형광을 나타내는 야생형 단백질은 해파리에서 자연적으로 발생합니다. Aequorea Victoria
egfp : GFP에 대한 고강도 방출을 갖는 야생형 GFP의 변형
은
을 의미합니다gfp : 녹색 형광 단백질
egfp : 강화 된 녹색 형광 단백질
원산지
gfp : 야생형
egfp : 돌연변이
64 아미노산
gfp : 페닐알라닌
egfp : 류신
65 아미노산
gfp : 세린
egfp : 트레오닌
색상의 밝기
gfp : 밝은 녹색
egfp : 더 밝은 녹색
여기 피크
gfp : 2 개의 피크 (395 nm 및 490 nm)
egfp : 단일 피크 (490 nm)
37 ° C에서의 폴딩 효율
gfp : 낮음
egfp : 높음
결론
gfp는 파란색 또는 자외선에 노출 될 때 밝은 녹색 형광을 나타내는 야생형 단백질입니다. EGFP는 GFP와 비교할 때 고강도 형광을 나타내는 GFP의 변형입니다. 따라서 GFP와 EGFP의 주요 차이점은 각 단백질이 방출되는 녹색 형광의 강도입니다.
참조 :
1. Arpino, James A. J., et al. "강화 된 녹색 형광 단백질의 1.35Å 해상도의 결정 구조는 GLU222에 대한 대안 적 형태를 나타낸다." PLOS 의학 , 과학 공공 도서관, 저널
이미지 제공 :
1. 결정 단백질의 후원하에 Raymond Keller (Raymond Keller (Talk))의“GFP 및 Fluorophore”. - Commons Wikimedia
2를 통한 자신의 작업 (공개 도메인). Zhao A, Tsechansky M, Swaminathan J, Cook L, Ellington AD 등의“FGAMS PPAT EGFP Puncta”. (2013) 일시적으로 형질 감염된 퓨린 생합성 효소는 스트레스 몸을 형성합니다. PLOS ONE 8 (2) :E56203. doi :10.1371/journal.pone.0056203 (CC x 3.0) Commons Wikimedia
