주요 차이 남부 북부와 서부 블로 팅 사이에는 남부 블로 팅은 DNA의 식별을 포함하고 북부 블 롯팅은 RNA의 식별을 포함하는 반면, 웨스턴 블 롯팅은 단백질의 식별을 포함한다.
남부, 북부 및 서부는 샘플에서 특정 DNA, RNA 또는 단백질 분자를 검출하는 데 사용되는 세 가지 블로 팅 기술입니다. 블 롯팅 동안, 거대 분자는 겔로부터 막으로 옮겨져 검출에 도움이되는 특정 핵산 또는 항체와 결합하도록 만들었다.
.주요 영역을 다루었습니다
1. 남부 블로 팅이란?
- 정의, 프로세스, 응용 프로그램
2. 북부 블 롯팅이란?
- 정의, 프로세스, 응용 프로그램
3. 웨스턴 블 롯팅이란?
- 정의, 프로세스, 응용 프로그램
4. 남부 북부와 서부 블로 팅의 유사점은 무엇입니까
- 공통 기능의 개요
5. 남부 북부와 서부 블로 팅의 차이점
- 주요 차이점 비교
주요 용어
항체, DNA, 전기 영동, 북부 블로 팅, RNA, 단백질, 남부 블로 팅, 웨스턴 블 롯팅
남부 블로 팅
Southern Blotting은 DNA의 혼합물에서 특정 DNA 서열을 감지하는 데 사용되는 기술입니다. 남부 블롯의 기본 단계는 다음과 같습니다.
electrophoresis - 겔 전기 영동에 의한 크기에 따라 DNA 샘플을 별개의 밴드로 분리합니다.
전송 - 전이 동안, 니트로 셀룰로스 막을 겔과 접촉하고 DNA 밴드가 모세관 작용을 통해 막으로 이동한다.
특정 시퀀스 감지 - 막상의 표적 서열은 하이브리드 화 프로브라고 불리는 특이 적 표지 된 올리고 뉴클레오티드 서열과 혼성화된다. 하이브리드 화 프로브는 단일 가닥 DNA 분자 크기가 100-500 bp 짧습니다. 하이브리드 화 완충액의 온도 및 염 농도에 의존하는 엄격 성은 혼성화에 영향을 미칩니다. 고온 및 낮은 염 농도에 의해 정의 된 높은 엄격 성은 하이브리드 화의 특이성을 증가시키는 반면, 저온 및 높은 염 농도로 정의 된 낮은 엄격 성은 특이성을 감소시킵니다.
그림 1 :Southern Blotting
남부 블로 팅의 주요 목적은 샘플에서 특정 DNA 서열을 감지하는 것입니다. 이 기술은 DNA 지문, 친자 관계 테스트, 피해자 식별 및 범죄 식별에 사용됩니다. 또한 RFLP (제한 단편 길이 다형성), 유전자 재 배열, 유전 질환 및 감염원의 돌연변이 및 확인에서 특정 유전자의 확인에 도움이됩니다.
.북부 블 롯팅
Northern Blotting은 RNA의 혼합물에서 특정 RNA를 감지하는 데 사용되는 기술입니다. 북부 블롯의 기본 단계는 다음과 같습니다.
electrophoresis - 크기에 따라 RNA 샘플을 별개의 대역으로 분리합니다.
전송 - 모세관 작용에 의해, 겔의 RNA 밴드는 막으로 옮겨집니다.
특정 시퀀스 감지 - 표적 RNA 서열은 DNA로 구성된 표지 된 올리고 뉴클레오티드 프로브로 혼성화에 의해 검출된다.
그림 2 :북부 블 롯팅
북부 블 롯팅은 샘플에서 특정 RNA 서열을 식별 할 수 있으므로 유전자 발현 연구에 사용될 수 있습니다. 질병 진단에도 도움이 될 수 있습니다.
웨스턴 블 롯팅이란?
웨스턴 블롯은 단백질의 혼합물에서 특정 아미노산 서열을 감지하는 데 사용되는 블로 팅 기술입니다. 웨스턴 블롯의 기본 단계는 다음과 같습니다.
전기 영동 - 개별 단백질은 SDS 페이지에 의해 크기에 따라 분리됩니다.
전송 - 겔의 단백질 밴드는 블로 팅에 의해 막으로 옮겨집니다.
특정 단백질의 탐지 - 분리 된 단백질을 갖는 막에는 특정 단백질에만 결합하는 1 차 항체와 함께 배양된다. 양 고추 냉이 퍼 옥시 다제 (HRP) 또는 알칼리성 포스파타제와 같은 효소로 표지되는 이차 항체를 사용하여 1 차 항체를 검출합니다. 기질과 함께 배양 할 때, 효소 작용은 막상의 특정 영역에 항체의 결합을 시각화한다.
.
그림 3 :웨스턴 블 롯팅
웨스턴 블로 팅을 단백질 블롯 또는 면역 블롯이라고도합니다. 그것은 샘플의 단백질의 수, 혈청에 박테리아 및 바이러스의 존재, 혈청에 HIV 항체의 존재를 확인할 수 있습니다. 또한 결함이있는 단백질을 감지 할 수 있습니다. 더욱이, 웨스턴 블 롯팅은 B 형 간염, Creutzfeldt-Jacob 질병, 라임 병 및 헤르페스에 대한 결정적인 테스트입니다.
남부 북부와 서부 블로 팅의 유사성
- Southern Blotting, Northern Blotting 및 Western Blotting은 샘플 내에서 특정 유형의 거대 분자를 식별하는 데 사용되는 세 가지 블 롯팅 기술입니다.
- 블로 팅 기술의 세 단계는 전기 영동, 전달 및 탐지입니다.
- 각 기술은 초과, 해당 거대 분자로 변성 및 차단이 필요합니다.
- 각 기술에는 생명 공학 및 의학에 응용 프로그램이 있습니다.
남부 북부와 서부 블로 팅의 차이
정의
Southern Blotting은 특정 DNA의 특정 서열을 식별하는 절차를 지칭하는 반면, 북부 블로 팅은 보완적인 DNA 및 웨스턴 블 롯팅과의 혼성화에 의해 특정 RNA의 특정 서열을 검출하는 데 사용되는 남부 블롯 시퀀스의 적응을 지칭한다.
에 의해 개발되었습니다
Southern Blotting은 1975 년 Edward M. Southern에 의해 개발되었습니다. Northern Blotting은 1979 년 Alwine과 그의 동료들에 의해 개발되었으며 Western Blotting은 1979 년 Stanford University에서 George Stark의 그룹에 의해 개발되었습니다.
.분자 감지
Southern Blotting은 특정 DNA 서열을 감지하고 북부 블 롯팅은 특정 RNA 서열을 감지하고 웨스턴 블 롯팅은 특정 단백질을 감지합니다.
겔 전기 영동
남부 블로 팅은 아가 로스 겔 전기 영동과 관련이 있으며, 북쪽 블로 팅은 포름 알데히드 아가 로스 젤을 변성시키는 반면 서부 블로 팅은 SDS 페이지를 포함합니다.
블로 팅 방법
남부와 북부 블로 팅은 모세관 전달과 관련이 있고 서부 블로 팅은 전기 전송과 관련이 있습니다.
프로브
Southern Blotting은 DNA 프로브를 사용하는 반면 북부 블로 팅은 cDNA 프로브를 사용하고 웨스턴 블 롯팅은 1 차 및 2 차 항체를 사용합니다.
응용
Southern Blotting은 특정 유전자 서열 및 DNA 지문에 사용됩니다. 북부 블 롯팅은 유전자 발현 분석에 사용되며 웨스턴 블 롯팅은 질병 진단에 사용됩니다.
결론
Southern Blotting은 특정 DNA 서열을 식별하는 반면, 북부 블 롯팅은 특정 RNA 서열을 식별하고 웨스턴 블 롯팅은 샘플에서 특정 단백질 서열을 식별합니다. 따라서 세 가지 블 롯팅 기술 사이의 주요 차이점은 그들이 감지하는 거대 분자의 유형입니다.
참조 :
1.“남부 블로 팅 :원칙, 절차 및 응용 프로그램 -.” 온라인 생물학 노트, 2017 년 12 월 4 일, 여기에서 제공
2. Kochunni, Deena T 및 Jazir Haneef. "북부 블 롯팅 :원리, 절차 및 응용 프로그램." 생물학 시험 4 u, 여기에서 제공
3. "서부 블 롯팅 기술 :원리, 절차 및 응용 프로그램 -." Biology Online Notes, 2017 년 12 월 4 일, 여기에서 구할 수 있습니다
이미지 제공 :
1.“그림 17 01 05”CNX OpenStax - (CC By 4.0) Commons Wikimedia
2. Ilewieszoośmiornicach의 "Northern Blot 다이어그램"-Commons Wikimedia
3을 통한 자신의 작업 (CC By-SA 4.0). Cawang의 "Western Blotting" - Commons Wikimedia를 통한 Own Work (CC0)
