따뜻한 트립신 화의 차이점은 무엇입니까?

따뜻하고 차가운 트립신 화는 트립신 화의 두 가지 기술, 1 차 세포 ​​배양에 사용되는 조직의 효소 분해 방법입니다. 여기서, 트립신은 배양에서 세포를 부착하는 단백질을 분해하는 단백질 분해 효소입니다.

주요 영역을 다루었습니다

1. 따뜻한 트립신 화
- 정의, 방법, 중요성
2. 콜드 트립신 화가란 무엇입니까
- 정의, 방법, 중요성
3. 따뜻함과 차가운 트립신 화 사이의 유사점은 무엇입니까
- 일반적인 기능의 개요
4. 따뜻함과 차가운 트립신 화의 차이점은 무엇입니까
- 주요 차이점 비교

주요 용어

단백질, 차가운 트립신 화, 효소 적 분해, 1 차 세포 ​​배양, 트립신, 따뜻한 트립신 화

따뜻한 트립신 화가 무엇인가

따뜻한 트립신 화는 조직의 효소 적 분해에 사용되는 두 가지 유형의 트립신 화 방법 중 하나입니다. 분해를 위해 36.50 ° C에서 따뜻한 트립신을 직접 사용합니다. 우선, 다진 조직을 DBSS (해부 기저 소금 용액)로 세척 한 다음 따뜻한 트립신으로 플라스크에 첨가된다. 해리 된 세포는 상청액에 있고, 각 30 분 간격으로, 해리 된 세포를 회수하기 위해 플라스크의 함량을 교반한다. 그런 다음, 신선한 트립신을 혼합물에 첨가합니다. 그리고,이 절차는 해리 된 세포를 회수하는 동안 3-4 시간 동안 계속 될 수있다. 마지막으로, 트립신은 원심 분리에 의해 혼합물로부터 제거 될 수있다. 

그림 1 :따뜻한 트립신 화

따뜻한 트립신 화는 따뜻한 트립신을 직접 사용하기 때문에 세포 수확의 가장 효과적인 방법입니다. 또한이 절차는 몇 시간 내에 완료 될 수 있습니다. 그러나 생존 세포의 수율은 따뜻한 트립신의 부작용으로 인해 적습니다.

콜드 트립신 화가 무엇인가

콜드 트립신 화는 트립신 화의 두 번째 방법입니다. 덜 효과적이지만 많은 양의 생존 세포를 산출합니다. 차가운 트립신 화의 단점 중 하나는 절차를 완료하는 데 걸리는 시간입니다. 일반적으로, 제조 된 조직은 먼저 4 ℃에서 약 6-24 시간 동안 차가운 트립신으로 담그다. 이어서, 회수 된 조직을 36.50 ℃에서 20-30 분 동안 잔류 트립신과 함께 배양한다. 반복 피펫 팅은 분리 된 세포를 분산시키는 데 도움이됩니다. 

그림 2 :콜드 트립신 화

그러나 앞에서 언급했듯이, 따뜻한 트립신에 대한 장기간 노출로 인한 손상된 세포의 위험은이 방법에서 최소화됩니다. 따라서,이 방법은 배양에서 개선 된 세포 생존력을 보여준다. 또한, 원심 분리 공간으로 인해이 방법은 기존 실험실에 적합합니다. 그럼에도 불구 하고이 방법의 주요 단점은 한 번에 대량의 조직에 사용할 수 없다는 것입니다.

따뜻함과 차가운 트립신 화 사이의 유사성

• 따뜻하고 차가운 트립신 화는 트립신 화의 두 가지 기술로, 세포 배양에서 준수 단백질의 효소 분해를 위해 트립신을 사용합니다.
• 1 차 세포 ​​배양을위한 조직을 준비하는 동안 두 가지 방법을 모두 사용할 수 있습니다.
• 또한 두 방법 모두 36.50 ° C에서 따뜻한 트립신을 사용합니다.
• 외에도 세포를 분리하는 데 도움이됩니다.

따뜻함과 차가운 트립신 화의 차이

정의

따뜻한 트립신 화는 36.50 ° C에서 트립신과의 조직의 배양과 관련된 트립신 화의 두 가지 방법 중 하나를 말하며, 그 후에는 원심 분리에 의해 트립신을 제거하는 반면, 콜드 트립신 화는 4 ° C에서 트립신과 관련된 다른 방법을 지적합니다. ° C. 따라서 이것은 따뜻하고 차가운 트립신 화의 주요 차이점입니다.

따뜻한 트립신 사용 (36.50 ° C)

따뜻한 트립신 화 사이의 또 다른 주요 차이점 중 하나는 조직이 따뜻한 트립신 화에서 3-4 시간 동안 따뜻한 트립신으로 치료하는 동안 조직은 20-30 분 동안 따뜻한 트립신과 함께 배양한다는 것입니다.

원심 분리

원심 분리는 따뜻하고 차가운 트립신 화 사이의 또 다른 차이점입니다. 원심 분리는 따뜻한 트립신 화에서 샘플로부터 트립신을 제거하기 위해 필수적이며, 콜드 트립신 화에는 원심 분리가 필요하지 않습니다.

효율성

또한 따뜻한 트립신 화는 더 효과적이며 냉 트리신 화는 덜 효과적입니다.

중요성

그 의미는 따뜻한 트립신 화 사이의 또 다른 차이점입니다. 따뜻한 트립신 화는 조직 내 세포에 손상을 일으킬 수있는 반면 따뜻한 트립신 화의 부작용은 차가운 트립신 화에서 제거되었습니다.

생존 세포의 수율

생존 세포의 수율은 따뜻한 트립신 화 사이의 또 다른 차이입니다. 따뜻한 트립신 화는 생존 세포의 양을 적게 생성하는 반면 생존 세포의 수율은 차가운 트립신 화에서 높습니다.

시간

더 따뜻한 트립신 화는 절차를 완료하는 데 시간이 줄어들고 냉 트리신 화는 더 많은 시간이 필요합니다.

응용

또한, 따뜻한 트립신 화는 세포 외 매트릭스와 섬유 결합 조직을 함유하는 조직에 사용되는 반면, 차가운 트립신 화는 배아 기관과 같은 연조직에 사용됩니다.

결론

따뜻한 트리신 화는 트립신 화의 방법으로, 단백질을 분해하기 위해 조직을 치료하기 위해 36.50 ° C에서 따뜻한 트립신을 사용합니다. 그것은 조직의 효소 분해의 효과적인 방법이지만, 따뜻한 트립신의 부작용으로 인해 적은 양의 생존 세포를 산출합니다. 이에 비해, 냉 트리신 화는 두 번째 트립신 화 방법이며, 이는 따뜻한 트립신과의 배양 전에 4 ℃에서 차가운 트립신으로 조직을 담그는 것을 포함한다. 이 방법은 덜 효과적이지만 많은 수의 생존 셀을 생성합니다. 따라서 따뜻한 트립신과 차가운 트립신 화의 주요 차이점은 따뜻한 트립신의 사용과 각 방법의 중요성입니다.