1. 효소 활성 최소화 :
- 많은 효소, 특히 프로테아제는 온도에 민감하고 더 높은 온도에서 활동이 증가합니다. 용해 완충액 및 세포 현탁액을 차갑게 유지하면 효소 활성이 크게 감소하여 단백질 및 핵산의 분해를 방지합니다. 이것은 온전한 단백질을 분리하거나 고품질 RNA를 추출하는 데 특히 중요합니다.
2. 셀룰러 성분 보존 :
- 세포막은 지질로 구성되어 있으며, 이는 더 높은 온도에서 더 유동화됩니다. 이 유동성은 막 파열 및 누출의 위험을 증가시켜 소기관 및 거대 분자와 같은 세포 성분의 손실을 초래합니다. 추운 조건은 막 무결성을 유지하고 원치 않는 방출을 방지합니다.
3. 생체 분자의 분해 감소 :
- 뉴 클레아 제 (핵산을 분해하는 효소)도 온도에 민감합니다. 추운 조건은 활성을 최소화하고 용해 중 DNA와 RNA를 분해 방지하는 데 도움이됩니다.
4. 세포 과정 속도 속도 :
- 세포의 대사 과정은 용해 후에도 계속됩니다. 용 해물을 차갑게 유지함으로써 이러한 과정을 늦추고 세포 성분의 저하를 최소화하고 세포 상태의보다 정확한 표현을 보장합니다.
5. 단백질 응집 촉진 :
- 경우에 따라 저온 온도는 실제로 특정 단백질의 응집을 촉진 할 수 있으며, 이는 단백질 정제 또는 결정화와 같은 다운 스트림 응용에 바람직 할 수 있습니다.
특정 고려 사항 :
- 사용 된 특정 온도 (예 :0 ° C 또는 4 ° C)는 특정 실험 및 표적 생체 분자의 민감도에 따라 다릅니다.
- 용해 완충제에서 프로테아제 억제제를 사용하면 따뜻한 온도에서도 단백질 분해를 더 최소화 할 수 있습니다.
요약하면, 세포 용해 동안 빙냉 상태를 사용하는 것은 세포 성분의 무결성을 유지하고, 생체 분자의 원치 않는 분해를 방지하고, 세포 상태의보다 정확한 표현을 보장하는 중요한 단계입니다.
