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총 단백질이 바이오 라드 분석에서 595 nm에서 측정되는 이유는 무엇입니까?

Bio-Rad 단백질 분석 (Bradford Assay라고도 함)은 실제로 595 nm에서 총 단백질을 측정하지 않습니다. 비색 분석 입니다 여기서 흡광도는 595 nm에서 측정됩니다 . 이유는 다음과 같습니다.

* Coomassie Brilliant Blue G-250 염료 : 분석법은이 염료를 사용하여 단백질에 결합합니다. 이 결합은 염료의 구조를 변화시키고 흡광도 스펙트럼의 이동을 유발합니다.

* 색상 변화 : 염료가 단백질에 결합하면 갈색에서 파란색으로 색이 변합니다. 이 파란색 형태는 595 nm에서 최대 흡광도를 갖습니다.

* 단백질 정량화 : 청색의 강도는 존재하는 단백질의 양에 직접 비례합니다. 595 nm에서 흡광도를 측정하여 단백질 농도를 정량화 할 수 있습니다.

요약 :

* Bio-Rad 분석법은 Coomassie Brilliant Blue G-250 염료를 사용하여 단백질에 결합합니다.

* 결합 된 염료는 파란색으로 변하고 595 nm에서 최대로 흡수됩니다.

* 단백질의 농도를 결정하기 위해 595 nm의 흡광도를 측정합니다.

따라서, 흡광도는 595 nm에서 측정되지만, 총 단백질은 직접 측정되는 것이 아니라 단백질에 대한 염료 결합으로 인한 색 변화입니다.

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