1. 표현 시스템 :
* 박테리아 : 대장균은 대량의 단백질을 생산하기위한 일반적인 선택입니다. 비교적 저렴하고 빠르게 성장합니다. GFP 유전자를 박테리아 플라스미드 (작은 원형 DNA 조각)에 삽입 하고이 플라스미드를 함유하는 박테리아를 선택해야합니다.
* 효모 : 효모는 단백질 생산, 특히 올바르게 접어야하는 복잡한 단백질의 또 다른 좋은 옵션입니다.
* 포유류 세포 : 포유 동물 세포는 인간 단백질과 구조와 기능이 더 유사한 단백질을 생성 할 수 있습니다. 이것은 단백질 기능을 연구하고 치료 단백질을 생성하는 데 유용 할 수 있습니다. 그러나 포유 동물 세포 배양은 더 복잡하고 비싸다.
2. 높은 수율에 대한 최적화 :
* 프로모터 선택 : 강한 프로모터 (유전자 전사를 시작하는 DNA 서열)는 높은 수준의 GFP 발현을 구동하기 위해 필수적이다.
* 코돈 최적화 : GFP 유전자에 대한 DNA 서열은 숙주 유기체의 번역 기계가 단백질 생성을 증가시키기 위해 최적화 될 수있다.
* 문화 조건 : 온도, 영양소 공급 및 산소 수준과 같은 조정 요인은 GFP 생산을 극대화 할 수 있습니다.
* 정제 기술 : 단백질이 생산 된 후, 다른 세포 성분으로부터 분리 및 정제해야합니다. 여기에는 특정 항체 또는 분자를 사용하여 GFP 단백질에 결합하고 오염 물질을 제거하는 친 화성 크로마토 그래피와 같은 기술이 포함됩니다.
3. 스케일 업 :
* 발효기 : 강력한 발현 시스템이 있으면 제어 된 환경에서 박테리아 또는 효모 세포를 재배 할 수있는 발효기, 대형 탱크를 사용하여 생산을 확장 할 수 있습니다.
* 생물 반응기 : 포유 동물 세포 배양의 경우, 생물 반응기는 세포 성장 및 단백질 생산을위한 제어 환경을 제공하는 데 사용됩니다.
중요한 고려 사항 :
* 품질 관리 : 생산 된 GFP 단백질이 순수하고 필요한 표준을 충족하는지 확인하십시오.
* 안전 : GFP가 인간과 관련된 연구 또는 응용 프로그램에 사용하기위한 경우 엄격한 테스트를 통해 안전을 보장하는 것이 중요합니다.
추가 메모 :
* 정확한 단계와 기술은 특정 적용 및 원하는 양의 GFP 단백질에 따라 다릅니다.
* 성공적이고 효율적인 생산을 보장하기 위해 단백질 발현, 정제 및 품질 관리 전문가와 협력하는 것이 중요합니다.
다른 질문이 있으면 알려주세요. 더 자세한 내용을 제공하거나 프로세스의 특정 측면을 탐색하게되어 기쁩니다!
