제한 효소가 DNA 단편을 만드는 방법
제한 엔도 뉴 클레아 제로도 알려진 제한 효소는 인식 부위라고하는 특정 서열에서 DNA를 자르는 분자 가위이다. 이 과정은 유전자 클로닝, DNA 지문 및 유전자 공학을 포함한 많은 분자 생물학 기술에 필수적입니다.
다음은 다른 제한 효소가 DNA 단편을 생성하는 방법입니다.
1. 대상 순서 인식 : 각각의 제한 효소는 특정 인식 부위, 짧은 서열의 DNA 뉴클레오티드 (보통 4-8베이스 쌍 길이)를 갖는다. 그들은이 서열에 결합하고 DNA 분자를 자릅니다.
2. DNA 절단 : 일단 인식 부위에 결합되면, 제한 효소는 DNA 골격 내의 포스 포 디스터 결합을 절단한다. 이 컷은 다음과 같습니다.
* 둔기 : 효소는 두 가닥의 DNA를 가로 질러 직접 절단되어 무딘 끝이 남습니다.
* 스티커 엔드 : 효소는 비틀 거리는 위치에서 절단되어 각 가닥에 돌출부를 남깁니다. 이 돌출부는 서로 보완 적이며 수소 결합을 통해 쉽게 다시 알릴 수 있기 때문에 끈적 끈적한 끝이라고합니다.
3. DNA 단편 생성 : 제한 효소에 의한 절단은 특정 말단을 갖는 2 개의 DNA 단편을 초래한다. 이들 단편의 크기 및 서열은 사용 된 효소 및 DNA 분자에서의 인식 부위의 위치에 의존한다.
다음은 다른 제한 효소가 다른 조각을 어떻게 생성하는지에 대한 몇 가지 예입니다.
* ecori : 이 효소는 서열 GAATTC를 인식하고 G와 A 사이의 절단을 인식하여 5 '돌출부로 끈적 끈적한 끝을 남긴다.
* hindiii : 이 효소는 서열 AAGCTT를 인식하고 a와 a 사이의 절단을 인식하여 5 '돌출부로 끈적 끈적한 끝을 남깁니다.
* smai : 이 효소는 서열 CCCGGG를 인식하고 두 가닥을 가로 질러 직접 절단하여 무딘 끝을 남깁니다.
다른 절단 스타일의 중요성 :
* 끈적 끈적한 끝 : 동일한 효소로 절단 된 상이한 DNA 분자의 단편이 함께 결찰되도록 허용한다. 이 과정은 DNA 클로닝에 필수적입니다.
* 무딘 끝 : 또한 결찰 될 수 있지만 끈적 끈적한 끝보다 덜 효율적입니다. 결찰 반응을 안내 할 보완적인 돌출부가 없기 때문입니다.
결론 :
상이한 제한 효소는 특정 서열을 인식하고 DNA 분자를 다른 방식으로 절단함으로써 독특한 DNA 단편을 생성한다. 이 특성은 분자 생물학 및 생명 공학의 다양한 응용에 대한 DNA의 정확한 조작을 허용합니다.
