1. DNA 단편 분석 :
* 제한 효소 소화 : 클로닝하는 동안 제한 효소를 사용하여 관심있는 DNA와 특정 서열에서 벡터 (플라스미드)를 절단합니다. 이것은 다양한 크기의 DNA 단편을 생성합니다.
* 겔 전기 영동 : 이어서, DNA 단편은 겔 전기 영동을 사용하여 크기에 기초하여 분리된다. 겔 매트릭스 (보통 아가 로스)가 사용되며 전류가 적용됩니다. 작은 조각은 더 큰 조각보다 젤을 통해 더 빠르고 더 멀리 이동합니다.
* 시각화 : DNA 단편은 UV 광 하에서 DNA에 결합하고 플루오 레스를 결합하는 염료를 사용하여 시각화된다. 이를 통해 다른 크기의 DNA 단편을 나타내는 겔에서 다른 DNA 밴드를 볼 수 있습니다.
2. 복제에 사용 :
* 제한 다이제스트 검증 : 전기 영동은 제한 효소가 올바른 부위에서 DNA를 성공적으로 자르고 벡터가 결찰을위한 올바른 제한 부위를 갖도록하는 데 도움이됩니다.
* 클론 분석 : 결찰 후 (DNA 삽입과 벡터와 결합) 전기 영동을 사용하여 결찰이 성공했는지 확인합니다. 재조합 DNA 분자의 크기를 원래 DNA 단편 및 벡터와 비교할 수 있습니다.
* 스크리닝 라이브러리 : 전기 영동을 사용하여 클론 라이브러리에서 DNA 삽입물을 분석하여 원하는 삽입물로 클론을 식별 할 수 있습니다.
요약 : 전기 영동은 핵심 복제 프로세스 자체의 일부가 아니지만 다른 단계를 검증하고 클로닝 실험이 성공하도록하는 데 필수적인 분석 도구입니다.