1. 인간 인슐린 유전자 분리 :
* DNA 추출 : 인간 DNA는 세포, 일반적으로 백혈구로부터 추출된다.
* 유전자 식별 : 인간 인슐린을 코딩하는 특정 DNA 서열은 PCR (중합 효소 연쇄 반응)과 같은 기술을 사용하여 확인된다.
2. 박테리아 벡터에 유전자를 삽입 :
* 벡터 선택 : 박테리아 플라스미드 (작은 원형 DNA 분자)는 벡터로 선택됩니다. 플라스미드는 박테리아에서 자연적으로 발견되며 독립적으로 복제 할 수 있습니다.
* 제한 효소 : 제한 효소라고하는 특수 효소는 인간 인슐린 유전자와 특정 위치에서 플라스미드를 절단하는 데 사용됩니다. 이것은 유전자를 플라스미드에 삽입 할 수있는 "끈적 끈적한 끝"을 만듭니다.
* 결찰 : 인간 인슐린 유전자 및 절단 플라스미드는 유전자를 플라스미드로 밀봉하는 DNA 리가 제라는 다른 효소와 함께 혼합된다.
3. 변형 박테리아 :
* 변형 : 변형 된 플라스미드 (현재 인간 인슐린 유전자를 함유 함)는 박테리아에 도입된다. 이것은 종종 열 충격 또는 전기 천공에 의해 수행됩니다. 박테리아는 플라스미드를 차지하고이를 자신의 DNA에 포함시킵니다.
4. 박테리아 성장 및 인슐린 생산 :
* 문화 성장 : 형질 전환 된 박테리아는 영양이 풍부한 배지를 함유 한 큰 발효 탱크에서 자랍니다. 이 매체는 박테리아가 자라는 데 필요한 모든 것을 제공합니다.
* 인슐린 생산 : 박테리아가 번식함에 따라, 그들은 인간 인슐린 유전자를 발현하여 인간 인슐린 단백질을 생성합니다.
5. 수확 및 정화 :
* 수확 : 박테리아는 탱크에서 수확됩니다. 그런 다음 인슐린을 박테리아로부터 추출하고, 일반적으로 세포를 열어서 파괴함으로써.
* 정제 : 추출 된 인슐린은 박테리아 오염 물질 및 기타 불순물을 제거하기위한 일련의 단계를 통해 정제되어 인간의 사용에 안전합니다.
6. 품질 관리 및 포장 :
* 테스트 : 정제 된 인슐린은 효능, 순도 및 안전성을 보장하기 위해 엄격한 품질 관리 테스트를 거칩니다.
* 포장 : 그런 다음 인슐린을 바이알, 주사기 또는 기타 전달 시스템으로 포장하여 당뇨병 환자가 사용할 수 있습니다.
인슐린 생산에 박테리아 사용의 주요 이점 :
* 높은 수율 : 박테리아는 많은 양의 인간 인슐린을 효율적으로 생산할 수 있습니다.
* 비용 효율성 : 박테리아 생산은 인슐린을 제조하는 비교적 저렴한 방법입니다.
* 순도와 안전 : 정제 과정은 인슐린이 인간의 사용에 안전하도록 보장합니다.
* 윤리적 고려 사항 : 박테리아를 사용하면 인슐린 (돼지와 같은)에 동물원을 사용하는 것과 관련된 윤리적 관심을 피할 수 있습니다.
중요한 참고 : 박테리아를 사용하여 인간 인슐린을 만드는 과정은 매우 복잡하며 특수 장비, 기술 및 품질 관리 조치가 포함됩니다.