도전 이해
곰팡이와 박테리아는 종종 비슷한 환경에서 번성합니다. 그것들을 분리하려면 그들의 뚜렷한 생물학적 특성을 이용하는 기술이 필요합니다.
분리 방법
1. 선택적 배지 :
* 원리 : 곰팡이와 박테리아는 영양 요구 사항이 다릅니다. 선택적 배지에는 한 유형의 미생물의 성장을 선호하는 동시에 다른 미생물의 성장을 억제하는 성분이 포함되어 있습니다.
* 예 :
* Sabouraud Dextrose Agar (SDA) : 높은 설탕 함량은 많은 박테리아를 억제하지만 곰팡이 성장을 지원합니다.
* 영양 한천 (NA) : 많은 박테리아의 성장을 지원하면서 종종 곰팡이에 적합하지 않습니다.
* 절차 :
* 혼합 문화의 작은 샘플을 SDA와 NA 플레이트 모두에 줄입니다.
* 며칠 동안 적절한 온도 (일반적으로 곰팡이의 경우 25-30 ° C, 박테리아의 경우 37 ° C)에서 배양하십시오.
* 식민지 판을 조사하십시오. 곰팡이는 종종 특징적인 거시적 특징 (퍼지 성장과 같은)을 생성하는 반면 박테리아는 일반적으로 매끄럽고 둥근 식민지를 형성합니다.
2. 항생제 :
* 원리 : 박테리아는 특정 항생제에 민감하지만 곰팡이는 일반적으로 더 저항력이 있습니다. 항생제는 박테리아 성장을 억제하는 데 사용될 수 있습니다.
* 절차 :
* 제거하려는 박테리아에 효과적인 항생제를 함유 한 영양 한천 플레이트를 준비하십시오.
* 혼합 문화를이 접시에 줄입니다.
* 플레이트를 배양하십시오. 곰팡이 식민지 만 자라야합니다.
* 중요 : 공부하고자하는 곰팡이에 크게 영향을 미치지 않는 항생제를 선택하십시오.
3. 미세 기술 :
* 원리 : 곰팡이와 박테리아는 뚜렷한 형태 학적 특성을 가지고 있습니다. 현미경은 그것들을 구별하는 데 도움이 될 수 있습니다.
* 절차 :
* 혼합 문화의 젖은 마운트 또는 스테인드 슬라이드를 준비하십시오.
* 현미경으로 샘플을 검사하십시오. 찾기 :
* 박테리아 : 다양한 모양 (막대, 코치, 나선)을 가진 작고 단세포 유기체.
* 곰팡이 : 포자를 형성 할 수있는 더 크고 종종 필라멘트 구조 (균사).
* 이 방법은 유기체를 식별하지만 반드시 분리하는 데 유용합니다.
4. 농축 기술 :
* 원리 : 여기에는 분리하고자하는 박테리아의 성장을 선호하는 조건을 만드는 것이 포함됩니다.
* 절차 :
* 박테리아 성장을 촉진하는 성분 (예 :고농도의 영양소)으로 영양소 국물을 준비하십시오.
* 혼합 문화와 국물을 접종하십시오.
* 국물을 배양하십시오. 박테리아는 곰팡이보다 더 빠르게 증가 할 것입니다.
* 박테리아 개체수가 충분히 높으면 국물을 새로운 영양 한천 플레이트에 줄입니다.
5. 전문 기술 (보다 복잡한 경우) :
* 여과 : 곰팡이 포자 나 큰 곰팡이 조각을 제거 해야하는 경우 멸균 필터를 사용할 수 있습니다.
* 원심 분리 : 밀도에 따라 분리되지만 혼합 배양에서는 어려울 수 있습니다.
* 유세포 분석법 : 이 방법은 레이저와 검출기를 사용하여 특성 (크기, 형광)에 따라 개별 셀을 식별하고 분리합니다.
중요한 고려 사항 :
* 무균 : 오염을 피하기 위해 멸균 기술을 유지하십시오.
* 식별 : 박테리아 분리 물이 의심되는 경우 적절한 기술 (예 :그램 염색, 생화학 적 테스트, 분자 방법)을 사용하여 정체성을 확인해야합니다.
* 안전 : 일부 곰팡이와 박테리아는 병원성이 될 수 있습니다. 배양을 처리 할 때 적절한 안전 예방 조치를 사용하십시오.
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