1. 삽입에 대한 호환성 :
* 일치하는 끈적 끈적한 끝 : 제한 효소는 특정 서열에서 DNA를 자르고 종종 "끈적 끈적한 끝" - 짧은 단일 가닥 돌출부를 만듭니다. 동일한 효소를 사용하면 공여자 DNA (관심 유전자)와 벡터 DNA (캐리어 분자)가 상보적인 끈적한 말단으로 절단되도록합니다. 이것은 유전자를 벡터에 효율적이고 정확한 삽입을 허용합니다.
2. 원치 않는 결말 예방 :
* 무작위 결합 방지 : 다른 제한 효소가 사용되는 경우, 생성 된 DNA 단편은 양립 할 수없는 끝을 가질 것이다. 이것은 그들이 올바르게 결합 할 수 없으며, 무작위적이고 예측할 수없는 조합으로 이어질 수 없다는 것을 의미합니다.
3. 적절한 표현 보장 :
* 읽기 프레임 유지 : 벡터에 삽입 된 유전자는 올바르게 발현되도록 올바른 판독 프레임에 있어야합니다. 동일한 제한 효소를 사용하면 유전자가 벡터 내에서 원하는 방향에 삽입되어 단백질 생산을위한 올바른 판독 프레임을 유지할 수 있습니다.
4. 단순화 된 클로닝 과정 :
* 간소화 된 워크 플로 : 동일한 제한 효소를 사용하면 각 단편에 대해 별도의 결찰 단계가 필요하지 않음으로써 복제 과정을 단순화합니다. 또한 오류의 가능성을 줄이고 전체 프로 시저를보다 효율적으로 만듭니다.
요약 : 공여자 및 벡터 DNA 모두에 대해 동일한 제한 효소를 사용하는 것은 관심 유전자의 벡터에 대한 효율적이고 정확한 삽입을 보장하기 위해 필수적이다. 적절한 결찰을 보장하고 올바른 판독 프레임을 유지하며 전체 복제 과정을 단순화합니다.
