단백질 전기 영동 :크기 및 전하에 의해 단백질 분리
단백질 전기 영동은 크기와 전하에 따라 단백질을 분리하는 데 사용되는 실험실 기술입니다. 이 기술은 다음을 포함한 다양한 응용 분야의 연구, 진단 및 임상 설정에 널리 사용됩니다.
* 단백질 식별 및 정량화 : 샘플에서 특정 단백질의 존재 및 양을 결정합니다.
* 단백질 순도 분석 : 단백질 샘플의 균질성 평가.
* 단백질 상호 작용 연구 : 단백질이 서로 또는 다른 분자와 어떻게 상호 작용하는지 조사합니다.
* 질병 진단 : 특정 질병과 관련된 비정상적인 단백질 패턴을 식별합니다.
단백질 전기 영동의 작동 방식 :
1. 샘플 준비 : 단백질 샘플을 완충 용액과 혼합하고 변성 (전개)하여 3 차 또는 4 차 구조를 제거하여 1 차 구조 (아미노산 서열) 만 남깁니다. 이를 통해 분리는 크기와 전하만을 기반으로합니다.
2. 겔 하중 : 변성 단백질 혼합물은 겔 매트릭스의 상단에서 웰에 로딩된다. 이 매트릭스는 일반적으로 다양한 크기 범위 내에서 단백질을 분리하는 능력을 위해 폴리 아크릴 아미드 (페이지)로 만들어집니다.
3. 전기 영동 : 전류가 겔에 걸쳐 전류가 적용되어 음으로 하전 된 단백질이 양성 전극 (양극)으로 이동하게한다. 이동 속도는 단백질의 크기와 전하에 따라 다릅니다.
* 크기 : 작은 단백질은 겔 매트릭스를 통해 더 빨리 움직입니다.
* 충전 : 음전하가 높은 단백질은 양극을 향해 더 빠르게 움직입니다.
4. 단백질 분리 : 단백질이 겔을 통해 이동함에 따라 크기와 전하에 따라 분리됩니다. 더 작고 더 부정적인 하전 된 단백질은 겔 아래로 더 이동합니다.
5. 시각화 : 전기 영동 후, 분리 된 단백질은 다음을 포함한 다양한 방법을 사용하여 시각화된다.
* Coomassie Blue 염색 : 단백질에 결합하여 볼 수있는 일반적인 염료.
* 은 염색 : 더 적은 양의 단백질을 검출하는보다 민감한 방법.
* 면역 블 롯팅 (웨스턴 블 롯팅) : 항체를 사용하여 겔 내의 특정 단백질을 검출하는 기술.
단백질 전기 영동의 유형 :
* SDS-PAGE (나트륨 도데 실 설페이트-폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동) : 이 방법은 주로 크기에 따라 단백질을 분리하는 데 사용됩니다. SDS는 단백질에 결합하여 균일 한 음전하를 제공하는 세제입니다.
* 기본 페이지 : 이 방법은 고유 전하 및 모양에 따라 단백질을 분리합니다. 이 기술에서 단백질은 변성되지 않습니다.
* 등전 초점 (IEF) : 이 방법은 단백질의 순 전하를 갖는 pH 인 그들의 등전점 (PI)에 기초하여 단백질을 분리한다.
단백질 전기 영동의 적용 :
* 연구 : 단백질 구조, 기능 및 상호 작용 연구.
* 진단 : 암, 감염 및 유전 적 장애와 같은 질병 진단.
* 임상 화학 : 혈액, 소변 및 기타 체액의 단백질 수준을 측정합니다.
* 제약 : 신약 개발 및 테스트.
결론 :
단백질 전기 영동은 연구원과 임상의가 크기와 전하에 따라 단백질을 분리하고 분석 할 수있는 다목적이고 강력한 기술입니다. 그것은 다양한 과학 및 의료 분야에서 중요한 역할을하며 단백질 구조, 기능 및 질병 과정에 대한 귀중한 통찰력을 제공합니다.
