1. 벡터 :
- 재조합 DNA가 먼저 벡터 에 삽입됩니다. 본질적으로 캐리어 분자입니다. 박테리아에 사용되는 일반적인 벡터는 다음과 같습니다.
- 플라스미드 : 박테리아 염색체와 독립적으로 복제하는 작고 원형 DNA 분자.
- 박테리오파지 : 박테리아를 감염시키는 바이러스.
2. 역량 :
- 박테리아는 유능한 를 만들도록 치료됩니다 , 그들이 외래 DNA를 섭취 할 가능성이 더 높다는 것을 의미합니다. 여기에는 종종 다음에 노출됩니다.
- 염화 칼슘 : 이것은 박테리아 세포벽을 약화시켜 DNA에 더 투과성이 있습니다.
- 열 충격 : 이것은 세포막에서 일시적인 구멍을 유도하여 DNA가 들어가도록 허용한다.
- 전기 천공 : 이것은 전기 펄스를 사용하여 세포막에 임시 기공을 만듭니다.
3. 변형 :
- 유능한 박테리아는 재조합 DNA를 함유하는 벡터와 혼합됩니다.
- 일부 박테리아는 세포막을 통해 벡터를 차지합니다.
4. 선택 :
- 벡터를 차지한 박테리아는 일반적으로 항생제 내성 마커를 사용하여 선택됩니다 . 벡터는 종종 항생제 내성에 대한 유전자를 전달하며, 벡터를 섭취 한 박테리아 만 항생제를 함유하는 배지에서 자라도록 허용합니다.
요약하면, 벡터 (플라스미드 또는 박테리오파지)는 재조합 DNA를 박테리아로 전달합니다. 이 과정은 변형이라고하며 박테리아를 유능하게 만들고 벡터를 제공합니다.
