변형이란 무엇입니까?
변형은 세포가 주변 환경에서 외래 DNA를 차지하는 과정입니다. 이 DNA는 박테리아에서 발견되는 작은 원형 DNA 조각이거나 선형 DNA 일 수있는 플라스미드의 형태 일 수있다. 세포 내부에 들어가면, 외래 DNA는 숙주 세포의 게놈에 통합 될 수 있거나 (플라스미드와 같은) 별도의 개체로 존재할 수있다.
재조합 DNA 구조의 변형 :
1. 재조합 DNA 생성 : 당신은 관심있는 DNA 조각 (발현하고 싶은 유전자)과 벡터 (보통 플라스미드)로 시작합니다. 이들은 제한 효소로 절단되어 호환 끈적 끈적한 끝을 만듭니다. 이어서, 유전자를 벡터로 결합하여 (결합) 재조합 DNA 분자를 생성한다.
2. 변형 준비 : 숙주 세포는 유능하게 만들어 지므로 DNA를 섭취 할 가능성이 더 높습니다. 이것은 염화 칼슘과 같은 화학 물질로 처리하거나 전기장 (전기 천공)에 노출시킴으로써 이루어집니다.
3. 재조합 DNA 소개 : 재조합 DNA 분자 (보통 플라스미드 형태)는 유능한 숙주 세포와 혼합된다. 이어서,이 혼합물을 특정 조건 하에서 인큐베이션하여 세포가 DNA를 섭취 할 수있게한다.
4. 선택 : 모든 세포가 재조합 DNA를 성공적으로 차지하는 것은 아닙니다. 형질 전환 된 세포를 확인하기 위해, 벡터는 일반적으로 항생제 내성과 같은 선택 가능한 마커 유전자를 함유한다. 변형 후, 세포는 항생제 함유 배지에서 성장된다. 항생제 내성 유전자로 플라스미드를 차지한 세포만이 살아남을 것입니다.
변환이 왜 중요한가?
* 유전자의 발현 : 일단 세포 내부에, 재조합 DNA를 전사 및 번역하여 원하는 단백질의 생산으로 이어질 수있다.
* 유전자의 복제 : 형질 전환 된 세포는 복제되고, 재조합 DNA는 숙주 세포의 DNA와 함께 복사되어 유전자의 많은 카피를 생산할 수있다.
* 연구 및 응용 : 형질 전환 된 세포는 유전자의 기능을 연구하거나 귀중한 단백질을 생산하거나 유전자 요법과 같은 다른 응용 분야에서 사용될 수 있습니다.
변형 유형 :
* 화학적 변형 : 이것은 세포가 염화 칼슘으로 처리되는 일반적으로 사용되는 방법으로, 막을 DNA에 더 투과성으로 만듭니다.
* 전기 천공 : 이 방법에서, 세포는 막에 임시 기공을 생성하여 DNA가 들어갈 수있는 간단한 전기 펄스에 노출된다.
* 바이러스 성 변환 : 바이러스는 벡터로 사용하여 외래 DNA를 세포로 전달할 수 있습니다. 이 방법은 종종 유전자 요법에 사용됩니다.
요약하면, 변환은 유전자 공학의 중요한 단계이며, 과학자들은 재조합 DNA를 세포에 도입하고 세포의 기계를 활용하여 관심 유전자를 발현하고 복제 할 수있게한다.
