이것이 작동하는 방법은 다음과 같습니다.
1. 선택 가능한 마커 유전자 : 재조합 플라스미드는 종종 특정 항생제에 대한 내성을 부여하는 유전자를 가지고 있습니다. 예를 들어, 암피실린 저항성 유전자 (AMPR).
2. 변형 : 박테리아는 재조합 플라스미드로 변형된다.
3. 선택 : 형질 전환 된 박테리아는 선택 가능한 마커 유전자가 저항성 (예를 들어, 암피실린)을 제공하는 항생제를 함유하는 배지에서 성장시킨다.
4. 성장 : AMPR 유전자로 재조합 플라스미드를 차지한 박테리아만이 항생제-함유 배지에서 생존하고 자랄 것이다. 항생제를 비활성화 할 수 있기 때문입니다.
5. 확인 : 박테리아가 실제로 재조합 플라스미드를 차지하도록하기 위해, PCR 또는 콜로니 혼성화와 같은 추가 확인 방법을 사용하여 플라스미드 내의 특정 DNA 서열의 존재를 검증 할 수있다.
예 :
* 녹색 형광 단백질 (GFP)을위한 유전자를 운반하는 재조합 플라스미드 및 AMPR 유전자는 박테리아를 변형시키는 데 사용됩니다.
* 박테리아는 암피실린을 함유 한 한천에 도금됩니다.
* 재조합 플라스미드 (GFP 및 AMPR 유전자 모두)를 함유하는 박테리아 만 자라게됩니다.
*이 식민지는 형광 현미경을 사용하여 GFP 발현을 위해 추가 스크리닝 될 수 있습니다.
이 방법은 재조합 플라스미드를받은 박테리아의 선택을 허용하고 성공적인 변형을 식별하는 간단한 방법을 제공합니다.
