1. 이황화 결합 감소 :
* 단백질 정제 및 분석 : DTT는 시스테인 잔기 사이에 형성된 공유 결합 인 단백질 내의 이황화 결합을 파괴한다. 이것은 다음과 같습니다.
* 단백질의 전개 및 변성 : 전기 영동과 같은 기술에서 크기 및 전하에 따라 단백질을 분리 할 수 있습니다.
* 단백질의 유전자 화 : 이황화 결합을 파괴함으로써, DTT는 단백질의 적절한 폴딩을 용이하게한다.
* 단백질 용해도 향상 : 감소 된 단백질은 종종 더 용해되어 처리하고 분석하기가 더 쉽습니다.
* 단백질 응집 방지 : DTT는 단백질을 감소 상태로 유지하여 정제 및 저장 중 응집을 최소화하는 데 도움이됩니다.
* 효소 및 항체 변형 : DTT는 효소 및 항체 내의 이황화 결합을 감소시키는 데 사용될 수 있으며, 이들의 활성 및 결합 특성에 영향을 미칩니다.
* DNA 및 RNA 조작 : DTT는 또한 제한 효소 및 리가 제와 같은 DNA 및 RNA 조작에 사용되는 효소에서 이황화 결합을 감소시키는 데 사용된다.
2. 산화로부터 보호 :
* 시약 및 용액 안정화 : DTT는 감소 제 및 완충제와 같은 민감한 화합물을 산화로부터 보호 할 수 있습니다.
* 세포 배양 매체 유지 : DTT는 필수 성분의 산화를 방지하고 세포 생존력을 유지하기 위해 세포 배양 배지에 첨가 될 수있다.
3. 기타 응용 프로그램 :
* 면역 침전 : DTT는 항체-항원 상호 작용에서 이황화 결합을 감소시켜 면역 침전 효율을 향상시킬 수있다.
* Proteomics Research : DTT는 2D 겔 전기 영동 및 질량 분석법과 같은 다양한 프로테오믹스 기술에 필수적이다.
* 현미경 : DTT는 전자 현미경에 사용되어 이황화 결합을 줄이고 샘플 준비를 향상시킬 수 있습니다.
행동 메커니즘 :
DTT는 전자를 기증하여 이황화 결합을 감소시켜 공정에서 산화되어 산화됩니다. 산화 된 DTT는 이량 체를 형성하며, 이는 비교적 안정적이고 비활성입니다. 이 반응은 가역적이지만 DTT는 강한 환원제이므로 평형은 표적 분자의 감소 된 상태를 선호합니다.
DTT의 장점 :
* 높은 감소 전력 : DTT는 강력한 환원제이며, 이황화 결합을 파괴하는데 효과적이다.
* 수용성 : DTT는 물에 쉽게 용해되어 다양한 수용액에 사용하기에 적합합니다.
* 안정성 : DTT는 실온 및 산소의 존재 하에서 비교적 안정적이다.
한계 :
* 독성 : DTT는 고농도로 독성이 될 수 있으므로주의해서 사용하는 것이 중요합니다.
* 반응성 : DTT는 다른 분자와 반응 할 수 있으므로 특정 실험에서 다른 시약과의 호환성을 고려하는 것이 중요합니다.
전반적으로 DTT는 다양한 과학 분야에서 다목적이고 필수적인 시약입니다. 이황화 결합을 줄이는 능력은 단백질 정제, 분석 및 조작을위한 귀중한 도구가됩니다.
