주요 차이 - 클로닝 벡터 대 발현 벡터
복제 벡터와 발현 벡터는 외래 DNA 세그먼트를 표적 세포로 운반하기 위해 재조합 DNA 기술에 사용되는 두 가지 유형의 벡터입니다. 클로닝 및 발현 벡터는 모두 복제의 기원, 고유 한 제한 부위 및 벡터 서열에서 선택 가능한 마커 유전자를 포함한다. 복제 및 발현 벡터는 복제 기원의 존재로 인해 자체 복제입니다. 클로닝 벡터는 플라스미드, 코스 미드 또는 박테리오파지 일 수있다. 주요 차이 클로닝 벡터와 발현 벡터 사이에는 클로닝 벡터가 외래 DNA 세그먼트를 숙주 세포로 운반하는 데 사용되는 반면, 발현 벡터는 최대 유전자 발현을 갖는 적합한 발현 신호를 포함하는 클로닝 벡터의 유형이다. .
주요 영역을 다루었습니다
1. 클로닝 벡터
- 정의, 유형, 사용
2. 표현식 벡터
- 정의, 유형, 사용
3. 클로닝 벡터와 발현 벡터의 유사점은 무엇입니까
- 일반적인 기능의 개요
4. 클로닝 벡터와 발현 벡터의 차이점은 무엇입니까
- 주요 차이점 비교
주요 용어 :박테리오파지, 클로닝 벡터, 코스 미드, DNA, DNA 기술, 발현 벡터, 복제 기원, 프로모터 영역, 재조합 RNA, 플라스미드, 제한 부위, 선택 가능한 마커
클로닝 벡터
클로닝 벡터는 캐리어 DNA 분자로서 작용한다. 모든 클로닝 벡터는 4 가지 특징을 갖습니다 :
- 그들은 그들이 가지고 다니는 외국 DNA 세그먼트와 함께 자기 복제입니다
- 그들은 여러 제한 사이트를 포함하고 있으며, 여기에는 벡터에 한 번만 존재합니다
- 그들은 일반적으로 항생제 내성 유전자 형태로 선택 가능한 마커를 가지고 있으며, 이는 숙주 게놈에 없다.
- 호스트 셀에서 회복하기가 상대적으로 쉽습니다.
목적에 따라 플라스미드, 파지 및 코스 미드와 같은 고전적인 클로닝 벡터의 선택은 많이 있습니다. 클로닝 벡터의 선택은 삽입 및 응용 프로그램의 크기에 따라 다릅니다.
플라스미드
플라스미드는 자연적으로 발생하며, 이중 가닥이 이중 가닥 DNA 분자이며, 박테리아 세포 내에서 자율적으로 복제 할 수 있습니다. 플라스미드에서 삽입물의 크기 한계는 10kb입니다. 플라스미드는 서브 클로닝 및 하류 조작, cDNA 클로닝 및 발현 분석에서 클로닝 벡터로서 사용된다. PBR322는 재조합 DNA 기술에 사용되도록 유전자 조작 된 최초의 플라스미드 중 하나입니다. PBR322 플라스미드는도 1 에 도시되어있다 .
그림 1 :PBR322
파지
파지는 cos 인 박테리오파지 람다에서 파생됩니다. 박테리오파지 람다의 부위는 파지 헤드에 포장 할 수 있습니다. 숙주 세포 내부의 벡터 DNA의 복제는 궁극적으로 세포 용해를 유발할 것이다. 파지 벡터에 삽입 할 수있는 삽입물의 크기는 5-12kb입니다. 파지 벡터는 게놈 DNA 클로닝, cDNA 클로닝 및 발현 라이브러리에 사용됩니다.
코스 미드
Cosmids는 cos 을 함유하는 일종의 플라스미드입니다. 세균성 람다 부위. cos 박테리오파지 람다의 부위는 파지 헤드에 포장 할 수 있습니다. 비록 그것이 플라스미드이지만, 숙주 셀 내부의 코스 미드의 복제는 파지 벡터에서와 같이 세포를 용해시키지 않을 수있다. 코스 미드 벡터로 클로닝 할 수있는 삽입물의 크기는 35-45 kb입니다. 코스 미드 벡터는 게놈 라이브러리 구조에 사용됩니다.
포유 동물 유전자의 크기가 100 kb보다 크기 때문에 완전한 유전자 서열은 고전적인 클로닝 벡터로 클로닝 될 수 없습니다. 이 문제는 숙주 세포 염색체의 특성을 벡터로 모방함으로써 우회된다. 이 유형의 벡터를 인공 염색체 벡터라고합니다. BAC (박테리아 인공 염색체 벡터), YACS (효모 인공 염색체 벡터) 및 MAC (포유 동물 인공 염색체 벡터)는 인공 염색체 벡터의 유형입니다.
BACS
박테리아 인공 염색체 벡터는 대장균을 기반으로합니다 coli f 인자 플라스미드. BAC 벡터로 클로닝 될 수있는 삽입물의 크기는 75-300 KB입니다. BAC 벡터는 큰 게놈 분석에 사용됩니다.
yacs
효모 인공 염색체 벡터는 saccharomyces 을 기반으로합니다. cerevisiae 센트로 미어, 텔로미어 및 기타 자율적으로 복제 된 서열. YAC 벡터로 클로닝 될 수있는 삽입물의 크기는 100-1 MB입니다. YAC 벡터는 큰 게놈 분석에 사용됩니다.
Macs
포유 동물 인공 염색체 벡터는 포유 동물 중심, 텔로미어 및 복제의 기원을 기반으로합니다. Mac의 삽입 크기는 100kb ~ 1MB입니다. Mac은 동물 생명 공학 및 인간 유전자 요법에 사용됩니다.
expression 벡터
expression 벡터, 표현 구성 라고도합니다. , 플라스미드의 유형입니다. 세포 전사 및 번역 기기의 사용과 함께 발현 벡터에 의해 형질 전환 된 유전자의 발현이 촉진되는 발현 벡터에 의해 특수 유전자가 숙주 세포에 도입된다. 발현 벡터는 인핸서 및 프로모터 영역과 같은 조절 서열을 포함하여 효율적인 유전자 발현을 초래한다. 숙주 세포 내부의 인슐린과 같은 특정 단백질의 발현 후, 생성물은 숙주 세포의 단백질로부터 정제되어야한다. 그 설명에서, 도입 된 단백질은 히스티딘 (그의 태그) 또는 다른 단백질로 태그된다. 숙주 세포 내부에서 도입 된 유전자의 효율적인 발현을 얻기 위해, 다음 발현 신호를 발현 벡터에 도입해야한다.
.- 강력한 프로모터의 삽입.
- 강한 종료 코돈의 삽입.
- 프로모터 영역과 클로닝 된 유전자 사이의 상당한 거리.
- 전사 개시 서열의 삽입.
- 번역 시작 시퀀스의 삽입.
그림 2 :pgex-3x
클로닝 벡터와 발현 벡터 사이의 유사성
- 클로닝과 발현 벡터는 모두 호스트 셀로 알려진 표적 세포에 외래 DNA 세그먼트를 도입하는 데 사용됩니다.
- 클로닝 벡터와 발현 벡터 모두 벡터 서열에서 복제의 원점, 고유 한 제한 부위 및 선택 가능한 마커 유전자와 같은 일반적인 기능을 공유합니다.
- 클로닝 벡터와 발현 벡터 모두 호스트 셀 내부에서 독립적으로 복제 할 수 있습니다.
클로닝 벡터와 발현 벡터의 차이
정의
클로닝 벡터 : 클로닝 벡터는 숙주 세포 내에서 안정적으로 유지 될 수있는 작은 DNA 조각이다. 삽입물의 수많은 사본을 얻는 동안 세포에 유전자를 도입하는 데 사용됩니다.
표현 벡터 : 발현 벡터는 특정 유전자를 표적 세포에 도입하는 데 사용되는 플라스미드이며 관련 유전자 생성물을 생산하기위한 지휘관 세포의 메커니즘입니다.
역할
클로닝 벡터 : 클로닝 벡터는 삽입 된 DNA 세그먼트의 수많은 사본을 얻기 위해 사용됩니다.
expression 벡터 : 발현 벡터는 단백질 또는 RNA 인 삽입 된 DNA 세그먼트의 유전자 생성물을 얻기 위해 사용된다.
유형
클로닝 벡터 : 클로닝 벡터는 플라스미드, 코스 미드, 파지, BAC, YAC 또는 Mac 일 수 있습니다.
표현 벡터 : 발현 벡터는 플라스미드 벡터입니다.
벡터의 특징
클로닝 벡터 :복제 벡터는 복제 기원, 고유 한 제한 사이트 및 선택 가능한 마커를 포함합니다.
expression 벡터 : 발현 벡터는 클로닝 벡터의 전형적인 특징 외에도 인핸서, 프로모터 영역, 종료 코돈, 전사 개시 서열 및 번역 개시 서열을 포함한다.
.결론
클로닝 벡터 및 발현 벡터는 표적 세포에 외래 DNA 세그먼트를 도입하기 위해 재조합 DNA 기술에 쉽게 사용됩니다. 클로닝 벡터 및 발현 벡터는 모두 숙주 셀 내부에서 자체적으로 복제 할 수있다. 클로닝 벡터는 전형적으로 도입 된 유전자의 수많은 사본을 달성하면서 표적 세포에 외래 유전자를 도입하는 데 사용된다. 발현 벡터를 사용하여 유전자 생성물, 호스트 세포 내부에 도입 된 유전자의 단백질 또는 RNA를 얻는다. 인슐린과 같은 재조합 단백질의 대부분은 발현 벡터의 사용에 의해 생성된다. 클로닝 벡터와 발현 벡터의 주요 차이점은 재조합 DNA 기술에서 각 벡터의 적용입니다.
참조 :
1.“클로닝 벡터.” 유전자의 클로닝 및 분자 분석. N.P., N.D. 편물. 여기에서 사용할 수 있습니다. 2017 년 6 월 18 일.
2. "셔틀 벡터와 발현 벡터." 무한한. Boundless, 2016 년 5 월 26 일. 웹. 여기에서 사용할 수 있습니다. 2017 년 6 월 18 일.
이미지 제공 :
1. Ayacop (+ Yikrazuul)의“PBR322” - Commons Wikimedia
2를 통한 자신의 작업 (공개 도메인). Magnus Manske의“PGEX-3X 클로닝 벡터”-Magnus Manske (CC By-SA 3.0)가 Commons Wikimedia
