나트륨 도데 실 설페이트-폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동 (SDS-PAGE)은 생명 공학에서 단백질을 분리하기 위해 사용되는 전기 영동 기술입니다. 분자량에 따라. 일반적으로, 단백질은 동일한 분자 내에서 양전하뿐만 아니라 양수 및 음전 전하를 모두 갖는 양서류 분자이다. 따라서, 전기 영동 동안 단일 방향으로 이동하기 위해 단백질 분자에 균일 한 음전하가 제공된다. 음전하는 음이온 성 세제 인 나트륨 도데 실 설페이트 (SDS)에 의해 주어진다. 고유 단백질은 단백질의 비공유 력을 방해함에 따라 SDS에 의해 변성됩니다.
주요 영역이 적용됩니다
1. SDS
- 정의, 구조
2. SDS는 어떻게 단백질을 변성시킵니다
- 단백질과 SDS 간의 상호 작용
3. SDS의 역할은 무엇입니까
- 페이지의 SDS
주요 용어 :전하/질량비, 분자량, 순 음전하, 단백질, 나트륨 도데 실 설페이트 (SDS), SDS-PAGE
sds
sds (나트륨 도데 실 설페이트)는 친수성 헤드 그룹과 소수성 꼬리로 구성된 음이온 성 세제를 나타냅니다. 따라서, 용해 될 때, 분자는 넓은 pH 범위 내에서 순 음전하를 형성한다. SDS의 구조는도 1에 도시되어있다 .
그림 1 :SDS
SDS는 어떻게 단백질을 변성합니까
SDS는 세제이기 때문에 단백질의 3 차 구조는 SDS에 의해 파괴되어 접힌 단백질을 선형 분자로 가져옵니다. 또한, SDS는 균일 한 방식으로 선형 단백질에 결합한다. 약 1.4 g SDS는 1g의 단백질에 결합한다. 따라서, SDS는 순 음전 전하에서 단백질을 균일하게 코팅한다. 이 음전하는 단백질의 아미노산의 다양한 유형의 R- 그룹에 대한 고유 전하를 가리킨다. 또한, 단백질의 전하는 분자량에 비례한다. SDS에 의한 선형화 된 단백질 분자는 폭이 18 angstroms이고 단백질의 길이는 분자량에 비례한다. 단백질과 SDS 사이의 상호 작용은 그림 2 에 나와 있습니다. .
그림 2 :SDS 및 단백질 상호 작용
SDS의 역할은 무엇입니까
특정 단백질에서 아미노산의 R- 그룹은 양전하 또는 음전하를 갖추어 단백질을 양서류 로 만들 수 있습니다. 분자. 따라서, 고유 상태에서, 동일한 분자량을 갖는 상이한 단백질은 겔에서 다른 속도로 이동한다. 이것은 폴리 아크릴 아미드 겔에서 단백질의 분리를 어렵게 만듭니다. 단백질에 SDS를 첨가하면 단백질을 거부하고 균일하게 분포 된 순 음전하로 덮는다. 이것은 전기 영동 동안 양성 전극으로 단백질의 이동을 허용한다. 다시 말해, SDS는 단백질 분자를 선형화하고 R- 그룹의 다양한 유형의 전하를 가리킨다. 결론적으로, SDS- 코팅 된 단백질의 전하 대 질량비는 동일하다; 따라서, 천연 단백질의 전하에 기초한 차등 이동은 없을 것이다. 적혈구 막 단백질의 SDS-PAGE는도 3에 도시되어있다. .
그림 3 :SDS-PAGE
SDS-PAGE 외에도 SDS는 세포막의 파괴 및 핵산의 해리를위한 핵산 추출의 세제로 사용됩니다. 단백질 복합체.
결론
sds는 다양한 유형의 생명 공학 기술에서 세제로 사용되는 음이온 세제입니다. 그것은 선형 단백질 분자를 생성하기 위해 단백질의 3 차 구조를 거부한다. 또한, 이는 변성 단백질에 균일 한 방식으로 결합하여 모든 유형의 단백질에 균일 한 전하 대 질량비를 제공합니다. 단백질의 아미노산의 R- 그룹에 전하를 가리함으로써 SDS에 의해 단백질 분자에 순 음전하가 제공된다. 따라서, SDS는 전하가 SDS에 의한 변성 단백질의 분자량에 비례하기 때문에 페이지의 분자량에 기초한 단백질의 분리를 허용한다.
.참조 :
1.“SDS 페이지의 작동 방식.” Bitesize Bio , 2018 년 2 월 16 일, 여기에서 구입할 수 있습니다.
이미지 제공 :
1. Cindyli2016의“구조 설명이 포함 된 SDS”-Commons Wikimedia
2를 통한 자신의 작업 (CC By-SA 4.0). Fdardel의 "Protein-SDS 상호 작용"-Commons Wikimedia
3을 통한 Commons Wikimedia
