형질 감염 효율을 계산하는 방법

형질 감염 효율은 특정 샘플에서 총 세포에 대해 형질 감염된 세포의 수를 계산하여 계산할 수 있습니다. 세포의 수는 두 가지 방법으로 계산 될 수 있습니다. 가장 자주 사용되는 방법은 쉽게 다루기 쉬운 기자를 사용하는 것입니다. 이들 리포터는 녹색 형광 단백질 (GFP), 루시퍼 라제, 베타-갈 락토시다 제, 분비 된 알칼리성 포스파타제 (SEAP) 일 수있다. 형질 감염 효율을 계산하는 가장 최근의 방법은 핵산을 표지하여 세포 내 전달을 추적하는 것입니다. 웨스턴 블 롯팅, 면역 염색 및 기능 분석과 같은 다른 접근법을 사용하여 형질 감염 효율을 계산할 수 있습니다. 형질 감염 효율은 다수의 실험 파라미터에 의존하기 때문에 형질 감염 효율의 결정은 형질 감염에 대한 다양한 요인의 영향을 결정하는 핵심이다.

주요 영역이 적용됩니다

1. 형질 감염 효율을 계산하는 데 사용되는 방법
- 리포터 시스템
2. 형질 감염 효율을 계산하는 방법
- 셀 카운팅

주요 용어 :유세포 분석, GFP, 핵산 표지, 리포터 시스템, 형질 감염 효율

형질 감염 효율을 계산하는 데 사용되는 방법

형질 감염 효율을 계산하는 데 다른 유형의 메소드가 사용됩니다.

1. 기자 시스템

그림 1 :형광 단백질

luciferase - 루시퍼 라제는 자연적으로 반딧불에서 발견되어 빛을 생성합니다. 루시퍼 라제 분석은 매우 민감하며 형질 감염된 DNA의 정량적 분석에 사용될 수 있습니다.
Beta-galactosidase -베타-갈 락토시다 제는 e에서 발견된다. coli . 그것은 X-Gal과 함께 수행 된 정 성적 분석 및 비색, 형광 또는 화학 발광 방법으로 수행 된 정량적 분석에 사용됩니다.
분비 된 알칼리성 포스파타제 (SEAP) - SEAP는 열 안정적인 리포터이며, 발현 될 때 포유 동물 세포에서 분비됩니다.

2. 핵산 표지 -형광-표지 된 플라스미드는 형질 감염에 사용될 수있다. 그런 다음 형광 현미경으로 계산할 수 있습니다.

3. 웨스턴 블 롯팅, 면역 염색 및 기타 기능 분석