주요 차이 콜로니와 플라크 혼성화 사이에서 콜로니 하이브리드 화는 원하는 유전자와 박테리아 식민지의 선택에 사용되는 방법이며, 플라크 혼성화는 원하는 유전자를 갖는 파지의 선택 방법이다. . 또한, 콜로니 혼성화는 플라스미드-또는 코스 미드 기반 라이브러리의 스크리닝에 사용될 수 있으며 플라크 하이브리드 화는 파지 라이브러리의 스크리닝에 사용될 수 있습니다.
콜로니와 플라크 혼성화는 게놈 또는 cDNA 라이브러리의 스크리닝에 사용되는 두 가지 기술입니다. 그들은 또한 콜로니 리프트 라고도합니다 및 플라크 리프트 각각.
주요 영역을 다루었습니다
1. 식민지 혼성화 란 무엇입니까
- 정의, 라이브러리 유형, 심사 방법
2. 플라크 하이브리드 화
- 정의, 라이브러리 유형, 심사 방법
3. 콜로니와 플라크 혼성화의 유사점은 무엇입니까
- 공통 기능의 개요
4. 식민지와 플라크 혼성화의 차이점은 무엇입니까?
- 주요 차이점 비교
주요 용어
식민지, 식민지 혼성화, 도서관 스크리닝, 플라크, 플라크 혼성화
콜로니 하이브리드 화가란 무엇입니까
콜로니 혼성화는 원하는 DNA 서열을 갖는 박테리아 식민지의 선택에 사용되는 스크리닝 방법입니다. Colony Blot Hybridization, Colony Lift 라고도합니다. 또는 복제 도금 . 그것은 고밀도로 도금 된 식민지의 스크리닝을 허용합니다. 식민지 혼성화의 원래 절차는 Grunstein과 Hogness에 의해 처음 개발되었습니다. 먼저, 박테리아 콜로니는 막으로 변형 될 수 있고 박테리아 콜로니는 용해되어 핵산을 노출시킨다. 그런 다음, 노출 된 핵산은이를 변성시킴으로써 막에 고정되어 방사성 프로브와 혼성화된다.
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그림 1 :콜로니 혼성화 방법
콜로니는 단일 박테리아 세포에서 무성 생식을 통해 개발 된 박테리아 클러스터입니다. 따라서, 특정 식민지의 모든 박테리아 세포는 변형 된 유전자 물질뿐만 아니라 동일한 유전자 구성을 보유하고있다. 일반적으로 박테리아는 플라스미드 또는 코스 미드 벡터의 도움으로 변형됩니다.
Plaque Hybridization
플라크 혼성화는 재조합 파지를위한 스크리닝 방법입니다. 1977 년 Benton과 Devis의 콜로니 혼성화의 수정입니다.이 방법은 Plaque Lift 라고도합니다. . 플라크 혼성화 절차는 콜로니 혼성화 절차와 유사하며 플라크는 니트로 셀룰로오스 막에 접촉하여 들어 올립니다. 그런 다음 핵산을 노출시키고 막에 고정시켜 원하는 프로브로 혼성화합니다.
그림 2 :한천 플레이트의 플라크
플라크는 해당 영역의 박테리아 세포의 용해에 의해 특정 박테리아 로지에 의해 생성 된 한천 플레이트의 투명 영역입니다. 니트로 셀룰로스 막으로 전달 된 DNA의 양이 적기 때문에 플라크 혼성화는 배경 신호를 줄입니다.
식민지와 플라크 혼성화의 유사성
- 식민지 및 플라크 혼성화는 게놈 또는 cDNA 라이브러리의 스크리닝에 사용되는 두 가지 기술입니다.
- 두 기술의 주요 원리는 핵산 혼성화입니다.
- 둘 다 필터 하이브리드 화 방법으로, 니트로 셀룰로스 막에서 현장 복제에 의해 라이브러리의 1 차 스크리닝을 허용합니다.
- 그들은 고밀도 스크리닝을 허용합니다.
- 단일 가닥 DNA 분자는 프로브로 사용되며, 특정 서열을 식별하기 위해 상보 서열에 혼성화 할 수있는 프로브로 사용됩니다.
- 두 혼성화 기술 모두 빠르며 매우 많은 수의 클론을 처리 할 수 있습니다.
- 그것들은 불완전한 유전자 서열의 식별에 사용되며, 표현할 수 없다.
식민지와 플라크 혼성화의 차이
정의
콜로니 하이브리드 화는 원하는 유전자를 가진 박테리아 식민지를 선택하는 방법을 말하면서 플라크 하이브리드 화는 재조합 파지의 식별에 사용되는 스크리닝 방법을 지칭합니다.
.에 의해 개발되었습니다
식민지 혼성화는 Grunstein과 Hogness에 의해 처음 개발되었으며 플라크 혼성화는 1977 년 Benton과 Devis에 의해 처음 개발되었습니다.
라이브러리 유형
식민지 혼성화는 플라스미드 또는 코스 미드 기반 라이브러리의 식별을 포함하는 반면 플라크 혼성화는 파지 라이브러리의 식별을 포함합니다.
리프트 수
콜로니는 한 번만 들어 올릴 수 있고 플라크는 여러 번 들어 올릴 수 있습니다.
배경 신호
더 많은 배경 신호가 식민지 혼성화에서 발생하는 반면 배경 신호는 플라크 하이브리드 화에서 덜 적용됩니다.
결론
콜로니 혼성화는 플라스미드 또는 코스 미드 벡터로 생산 된 라이브러리에서 박테리아 식민지의 스크리닝 방법입니다. 한편, 플라크 혼성화는 파지 라이브러리에서 박테리오파지의 스크리닝 방법이다. 콜로니와 플라크 혼성화의 주요 차이점은 각 방법에서 스크리닝 된 라이브러리 유형입니다.
참조 :
1. Kaksonen, Anna. "미생물 커뮤니티 분석을위한 분자 접근법." 침출 - Biominewiki, 2006 년 4 월 20 일, 여기에서 구입할 수 있습니다
2. Dale, J W 및 P J Greenaway. "플라크 혼성화에 의한 재조합 파지의 식별." 분자 생물학의 방법 (Clifton, N.J.), 미국 국립 의학 도서관, 여기에서 구할 수 있습니다
이미지 제공 :
1. Kaksonen의“Blot Hybridization” - http://wiki.biomine.skelleftea.se/biomine/molecular/index_22.htm (공개 도메인)을 통해 Wikimedia
2. "중. Smegmatis Plaque”by Wazzzup7up - Commons Wikimedia를 통해 자신의 작업 (공개 도메인)
