주요 차이 게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리 사이에서 게놈 DNA 분리는 세포막의 효소 적 또는 기계적 분해를 포함하여 강한 용해를 사용하여 게놈 DNA를 용액으로 방출하는 반면, 플라스미드 DNA 분리는 가벼운 알칼리성 용해를 사용하여 게놈 DNA와 함께 플라스미드 DNA를 얻는다. . 또한, 게놈 DNA 분리에서, 세포 용해 후, 게놈 DNA가 지질 막 및 단백질로부터 정제 될 수 있고, 플라스미드 DNA 분리에서, 아세테이트 칼륨으로의 중화는 게놈 DNA로부터 플라스미드 DNA를 분리 할 것이다.
게놈 DNA 및 플라스미드 DNA 분리는 생명 공학에서 다른 기술에 사용하기 위해 DNA 분리에 중요한 두 가지 추출 방법입니다.
주요 영역을 다루었습니다
1. 게놈 DNA 분리
- 정의, 프로세스, 중요성
2. 플라스미드 DNA 분리
- 정의, 프로세스, 중요성
3. 게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리의 유사점은 무엇입니까
- 일반적인 기능의 개요
4. 게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리의 차이점은 무엇입니까
- 주요 차이점 비교
주요 용어
세포 용해, 게놈 DNA 분리, 플라스미드 DNA 분리
게놈 DNA 분리 가란?
게놈 DNA 분리는 세포에서 게놈 DNA의 추출 절차입니다. 게놈 DNA 분리의 주요 특징 중 하나는 게놈 DNA를 용액으로 방출하기 위해 강한 용해 단계가 필요하다는 것입니다. 일반적으로, 세포벽은 리소자임 및 단백질 효소 K에 의해 효소 적으로 분해 될 수있다. 대조적으로, 세포벽의 기계적 분해는 소용돌이에서 비드 박동에 의해보다 보편적 인 과정이다. 세포 용해 후, 페놀 클로로포름 추출 또는 다른 방법에 의한 DNA 정제는 지질 이중층, 단백질 및 기타 세포 파편을 세척하는 데 필수적이다.
그림 1 :게놈 DNA 분리
게놈 DNA의 저하는 게놈 DNA 분리 중에 발생하는 주요 단점 중 하나입니다. 따라서, 저온을 유지하거나 화학적 억제제를 사용하여 추출 중 염색체 파손을 방지하는 것이 필수적입니다.
플라스미드 DNA 분리
플라스미드 DNA 분리는 세포에서 플라스미드 DNA의 추출 과정입니다. 또한 이들 세포의 게놈 DNA로부터 플라스미드 DNA를 유지한다. 그러나, 플라스미드 DNA 분리의 주요 점 중 하나는 알칼리성 용해와 같은 가벼운 세포 용해 절차를 수행하는 것입니다. 기본적으로, 알칼리성 용해의 완충제는 수산화 나트륨 및 SDS를 함유하며, 이는 플라스미드 DNA 및 게놈 DNA를 완전히 변성시킨다. 그러나 과도한 변성을 방지하는 것이 필수적이며, 이는 플라스미드 DNA를 돌이킬 수 없게 변성 할 수 있습니다.
그림 2 :플라스미드 DNA 분리
세포 용해를 따르는 단계는 플라스미드 DNA 분리의 중화입니다. 일반적으로, 아세테이트 칼륨은 중화를위한 시약입니다. 게놈 DNA와 비교하여 작은 크기의 플라스미드 DNA로 인해, 플라스미드 DNA는 쉽게 유전자 화를 겪는 반면, 게놈 DNA는 얽힌 경향이있다. 그 후, 원심 분리는 단백질에 결합 된 게놈 DNA를 함유하는 펠렛을 형성 할 수있다. 따라서, 플라스미드 DNA는 상청액에 남아있다. 궁극적으로,이 플라스미드 DNA는 에탄올로 침전 될 수있다.
게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리 사이의 유사성
- 이것은 생명 공학에서 사용되는 두 가지 DNA 추출 방법입니다.
- 두 유형의 DNA 분리의 두 가지 주요 단계는 DNA의 세포 용해 및 정제입니다.
게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리의 차이
정의
게놈 DNA 분리는 생물학적 샘플에서 DNA를 분리하는 데 사용되는 기술을 지칭하는 반면, 플라스미드 DNA 분리는 생물학적 샘플로부터 플라스미드 DNA의 분리를 지칭한다.
샘플
게놈 DNA는 상이한 생물학적 샘플에서 분리 될 수 있으며, 플라스미드 DNA 분리는 주로 박테리아 또는 곰팡이의 세포 배양에서 나온 것입니다.
세포 용해
또한 세포 용해는 게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리의 주요 차이점입니다. 게놈 DNA 분리는 세포막의 효소 적 또는 기계적 파괴를 포함하여 강한 용해를 사용하여 게놈 DNA를 용액으로 방출하는 반면, 플라스미드 DNA 분리는 가벼운 알칼리성 용해를 사용하여 게놈 DNA와 함께 플라스미드 DNA를 용액으로 가져옵니다.
변성
게놈 DNA 분리에 대한 세포 용해 완충제의 pH는 7-9이며, 이는 플라스미드 DNA 분리의 세포 용해 완충액의 pH가 12.1-12.3이며, 이는 플라스미드 DNA와 게놈 DNA를 모두 거부합니다.
두 번째 단계
세포 용해에 따라, 게놈 DNA는 플라스미드 DNA 분리에서 지질 막 및 단백질로부터 정제 될 수있다.
원심 분리 중원심 분리 중에 게놈 DNA가 펠릿에 나타나고 플라스미드 DNA가 상청액에 나타납니다.
의 중요성
또한 게놈 DNA 분리는 매우 간단한 방법이며 플라스미드 DNA 분리는 더 민감한 방법입니다.
다운 스트림 애플리케이션
게놈 DNA 분리의 다운 스트림 응용은 PCR 또는 시퀀싱 일 수있는 반면, 플라스미드 DNA 분리의 다운 스트림 응용은 클로닝 형질 감염 또는 유전자 요법 일 수 있습니다.
결론
게놈 DNA 분리는 다른 유형의 생물학적 샘플에서 DNA를 추출하는 방법입니다. 일반적으로, 이는 더 간단한 방법이며, 이는 지질 이중층, 단백질 및 기타 세포 잔해로부터의 게놈 DNA 정제와이어서 세포막의 가혹한 파괴를 포함한다. 한편, 플라스미드 DNA 분리는 온화한 알칼리성 용해를 사용하여 개방 세포막을 파괴하는보다 민감한 방법이다. 또한, 이는 게놈 DNA로부터 플라스미드 DNA를 분리하기위한 중화 단계를 함유한다. 마지막으로, 플라스미드 DNA는 상청액에서 발생한다. 따라서, 게놈 DNA와 플라스미드 DNA 분리의 주요 차이점은 세포 용해 및 DNA의 정제 방법이다.
참조 :
1. 케네디, 수잔. "플라스미드 대 게놈 DNA 추출 :차이." Bitesize Bio, 2019 년 6 월 20 일, 여기에서 구입할 수 있습니다.
이미지 제공 :
1.“그림 17 01 02”CNX OpenStax (CC x 4.0)의 Commons Wikimedia
2. Commons Wikimedia
