주요 차이 니트로 셀룰로스와 PVDF 막 사이의 니트로 셀룰로스 막은 단백질 결합 능력이 높고 PVDF 막은 비교적 낮은 단백질 결합 능력을 갖는다. 또한, 단백질 분자는 소수성 상호 작용을 통해 니트로 셀룰로스 막에 결합하는 반면, 단백질 분자는 소수성 상호 작용 및 쌍극자 상호 작용을 통해 PVDF 막에 결합한다. 또한, 니트로 셀룰로스 막은 PVDF 막보다 높은 감도를 갖는다.
니트로 셀룰로스 및 PVDF 막은 겔 전기 영동에 의해 분리 된 단백질을 전달하기 위해 웨스턴 블롯에 사용되는 두 가지 유형의 막입니다. 일반적으로, 블 롯팅에서 막의 주요 기능은 단백질 단편을 보유하는 물리적 스캐 폴드로서 작용하는 것이다.
주요 영역을 다루었습니다
1. 니트로 셀룰로스 막
- 정의, 특성, 중요성
2. PVDF 멤브레인이란 무엇입니까
- 정의, 특성, 중요성
3. 니트로 셀룰로스와 PVDF 막의 유사점은 무엇입니까
- 일반적인 기능의 개요
4. 니트로 셀룰로스와 PVDF 막의 차이는 무엇입니까
- 주요 차이점 비교
주요 용어
니트로 셀룰로스 막, 단백질 결합 능력, PVDF 막, 감도, 웨스턴 블롯
니트로 셀룰로스 막
니트로 셀룰로스 막은 웨스턴 블 롯팅에 사용되는 첫 번째 유형의 막 중 하나입니다. 이 기술은 여전히 순간적이고 거의 돌이킬 수 없기 때문에 여전히 가장 인기있는 선택입니다. 또한, 니트로 셀룰로스 막은 쉽게 수화됩니다. 그러나 스트리핑, 재생 또는 가혹한 화학적 처리에 적합하지 않습니다. 지지 된 니트로 셀룰로스 막은 불활성지지 구조가 강도와 탄력성을 증가시키기 때문에 세트 선택 중 하나입니다.
그림 1 :전기 영동 전달
웨스턴 블 롯팅에서 겔상의 단백질 조각은 전기 영동 전달이라는 과정에서 니트로 셀룰로스 막으로 옮겨집니다. 이 과정의 원칙은 음전 차전 된 단백질을 양극으로 이동하는 것입니다.
PVDF 막
pvdf 멤브레인은 웨스턴 블 롯팅에 사용되는 다른 유형의 멤브레인입니다. 니트로 셀룰로스 막과 비교할 때 단백질 결합 능력이 더 높다. 따라서 이것은 검출의 민감도도 증가시킵니다. 그러나, 증가 된 감도는 낮은 발현 단백질의 검출로 인해 더 높은 배경을 초래한다.
그림 2 :니트로 셀룰로스 막
니트로 셀룰로오스 막과 관련하여, PVDF 막은 전달 완충제와 함께 사용하기 전에 메탄올과 사전 습기 일 필요는 없습니다. 이것은 낮은 SDS/높은 메탄올 용액에 의한 고 분자량 단백질의 침전을 방지한다. 한편, 전달 완충액에서 SDS의 존재는 PVDF 막의 블 롯팅 효율을 증가시킨다.
니트로 셀룰로스와 PVDF 막 사이의 유사성
- Nitrocellulose 및 PVDF 멤브레인은 웨스턴 블롯에 사용되는 두 가지 유형의 멤브레인입니다.
- 겔에서 분리 된 단백질 단편의 결합에 중요합니다.
- 또한 변환 프로세스는 전기 영동 전송이라는 프로세스에서 발생합니다.
- 단백질은 주로 소수성 상호 작용을 통해 막에 결합합니다.
- 일반적인 기공 크기는 0.1, 0.2 또는 0.45 μm입니다. 기본적으로, 0.1 및 0.2 μm 기공 크기는 작은 펩티드 및 15 kDa 미만의 저 분자량 단백질에 중요하다. 0.45 μm 막은 대부분의 단백질 블 롯팅에 적합하다. 한편, 단백질의 정량화 및 저농도로 로딩 될 때 작은 기공 크기가 더 좋습니다.
- 메탄올의 사전 절단 및 사전 습류는 편의, 재생성 및 처리량 애플리케이션에 이상적입니다.
- 둘 다 단백질 결합 용량과 감도를 상당히 높습니다.
- 배경과 비특이적 바인딩에 저항 할 수 있습니다.
니트로 셀룰로스와 PVDF 막의 차이
정의
니트로 셀룰로스 막은 웨스턴 블롯에서 단백질의 고정화에 사용되는 끈적 끈적한 막을 나타냅니다. 한편, PVDF 막은 높은 결합 용량을 갖는 단백질 전달을 위해 웨스턴 블롯에 사용 된 다른 유형의 막을 지칭한다.
물리적 특성
니트로 셀룰로스 막은 부서지기 쉬우 며 깨지기 쉬운 반면, PVDF 막은 물리적으로 내구성이 있습니다.
화학 저항성
니트로 셀룰로스 막은 화학적으로 저항력이 없지만 PVDF 막은 화학적으로 저항력이 있습니다.
사전 습윤
니트로 셀룰로스 막은 메탄올로 사전 습윤되어야하는 반면, PVDF 막은 사전 습윤을 할 필요가 없습니다.
단백질 결합 용량
또한, 니트로 셀룰로스 막은 비교적 낮은 단백질 결합 능력 (80-100 μg/cm2)을 가지며 PVDF 막은 높은 단백질 결합 능력 (170-200 μg/cm2)을 갖는다.
단백질의 상호 작용단백질은 소수성 상호 작용을 통해 니트로 셀룰로스 막에 결합하면서 소수성 및 쌍극자 상호 작용을 통해 PVDF 막에 결합합니다.
SDS
니트로 셀룰로스 막은 전달 완충액에서 SDS를 필요로하지 않으며, 이는 저 분자량 단백질의 결합을 향상시키고 막을 통해 단백질의 과잉 전달을 방지하는 반면, 단백질의 단백질이 PVDF 막으로의 혈관 효율을 향상시킨다.
서부 블로 팅에서의 사용
니트로 셀룰로스 막은 저 분자량 단백질에 사용되는 반면, PVDF 막은 고 분자량 단백질에 사용됩니다.
감도
또한, 니트로 셀룰로스 막은 비교적 감도가 낮고, PVDF 막은 더 높은 결합 용량으로 인해 높은 감도를 갖는다.
배경
니트로 셀룰로스 막은 감도가 적기 때문에 더 낮은 배경을 생성하는 반면, PVDF 막은 발현이 낮은 단백질의 검출에서 더 큰 감도로 인해 더 높은 배경을 갖는다.
스트리핑 및 재생
이것들 외에도, 니트로 셀룰로스 막은 스트라이프하고 재발하기가 어렵고 PVDF 막은 더 높은 소수성으로 인해 스트라이프하고 다시 보복하기가 쉽습니다.
기타 용도
니트로 셀룰로스 막은 핵산 (<300 bp), 아미노산 분석 및 도트/슬롯 블 롯팅의 분석에 사용됩니다.
결론
니트로 셀룰로스 막은 웨스턴 블롯에서 중요한 막의 유형입니다. 그러나, 그것은 단백질 결합 능력과 감도가 비교적 낮습니다. 또한 더 낮은 배경을 생성합니다. 더욱이, 그것은 주로 고 분자량 단백질의 분리에 사용된다. PVDF 막은 고 분자량 단백질의 분리를 위해 웨스턴 블롯에 사용되는 다른 유형의 막이다. 또한,이 막은 비교적 높은 단백질 결합 능력 및 감도를 갖는다. 그러나 더 높은 배경을 생성합니다. 따라서, 니트로 셀룰로스와 PVDF 막의 주요 차이점은 단백질 결합 능력과 감도입니다.
