그람 양성 박테리아의 세포벽은 복잡한 다당류 인 펩티도 글리 칸의 두꺼운 층을 함유한다. 반면에 그람 음성 박테리아의 세포벽은 외막으로 둘러싸인 펩티도 글리 칸의 얇은 층을 함유한다.
그램 염색 절차는 크리스탈 바이올렛 용액, 요오드 용액, 아세톤-알코올 용액 및 사프라닌 용액의 순차적 인 적용을 포함한다. 크리스탈 바이올렛은 그람 양성 및 그람 음성 박테리아의 세포벽을 관통하는 주요 얼룩입니다. 이어서, 요오드를 첨가하여 크리스탈 바이올렛과 복합체를 형성하여 세포벽의 염색을 더욱 향상시킨다. 아세톤-알코올 용액은 분화 제로서 작용하여 그람 음성 박테리아의 세포벽이 탈색되는 것을 유발한다. 마지막으로, 사프라닌은 그램 음성 박테리아의 탈색 된 세포벽을 염색하여 카운터 스테인으로 첨가된다.
그램 염색은 일반적으로 세포벽 구조의 차이로 인해 진핵 생물에 적용되지 않습니다. 진균, 식물 및 동물을 포함하는 진핵 생물은 주로 셀룰로오스 또는 키틴으로 구성된 세포벽을 가지고 있습니다. 이들 세포벽 성분은 박테리아의 펩티도 글리 칸 세포벽이하는 것과 같은 방식으로 그램 얼룩과 반응하지 않는다. 결과적으로, 진핵 생물은 일반적으로 그램 염색을 유지하지 않으며 그램 염색 후 현미경에서 볼 때 무색으로 나타납니다.
그램 염색이 일반적으로 진핵 생물에 적용되지 않는 또 다른 이유는 식별 및 분화가 필요하지 않기 때문입니다. 진핵 생물은 그들의 형태, 유전 적 특성 및 기타 특정 세포 구조에 기초하여 다른 그룹으로 분류됩니다. 헤 마톡 실린 및 에오신 염색과 같은 상이한 염색 기술은 일반적으로 진핵 세포를 시각화하고 분화시키는 데 사용된다.
요약하면, 그램 염색은 주로 세포벽 구조에 기초한 박테리아의 분류 및 식별에 사용된다. 세포벽은 박테리아의 세포벽과 다르고 대체 염색 방법을 사용하여 효과적으로 식별 할 수 있기 때문에 일반적으로 진핵 생물에 적용되지 않습니다.