1. 샘플 준비 :
* DNA는 세포로부터 추출한 다음 제한 효소로 소화된다. 이 효소는 특정 서열에서 DNA를 자르고 다양한 크기의 조각을 만듭니다.
* DNA 단편은 가시성을 위해 염료 (보통 브로 모 페놀 블루)를 함유하는 하중 완충제와 겔로 가라 앉는 데 도움이되는 밀도가 높은 용액 (예 :글리세롤)과 혼합된다.
2. 겔 준비 :
* 젤은 아가 로스 또는 폴리 아크릴 아미드와 같은 다공성 물질을 사용하여 만들어집니다. 겔은 체로서 작용하여 작은 DNA 조각이 더 큰 조각보다 더 쉽게 이동할 수있게한다.
* 겔은 전기를 전도하는 완충액으로 채워진 전기 영동 챔버에 배치됩니다.
3. 전기 영동 :
* DNA 샘플은 겔의 한쪽 끝에서 우물에로드됩니다.
* 전류가 젤에 가해집니다.
* DNA는 음으로 하전되어 양극 전극으로 이동합니다.
* 작은 DNA 단편은 겔을 더 빨리 더 큰 단편보다 빠르게 이동시켜 크기에 따라 분리됩니다.
4. 시각화 :
* 전기 영동 후, DNA 단편은 DNA에 결합하고 UV 광 하에서 시각화 될 수있는 형광 염료 (에티 디움 브로마이드 또는 SYBR 녹색)로 염색된다.
* DNA 단편은 겔의 밴드로 나타나고 작은 조각은 겔 아래로 더 나타납니다.
다른 길이의 DNA 세그먼트를 분리하는 다른 방법 :
* 크로마토 그래피 : 이 방법은 DNA 단편의 다른 특성을 사용하여 고정 단계에 대한 친화력과 같은 DNA 조각을 분리합니다.
* 모세관 전기 영동 : 겔 전기 영동과 유사하지만 겔 대신 좁은 모세관 튜브를 사용합니다. 이 방법은 더 높은 해상도와 더 빠른 분리를 제공합니다.
* 필드 흐름 분류 (FFF) : 이 기술은 크기 및 확산 특성에 따라 분자를 분리합니다. 그것은 캐리어 유체의 층류 및 전공 (예 :중력 또는 전기장)의 층류를 사용하여 입자를 분리합니다.
DNA 분리의 적용 :
* 유전자 분석 : 돌연변이, 유전자 장애 및 친자 관계 검사를 식별합니다.
* 법의학 : 범죄 현장에서 용의자까지 DNA 샘플을 일치시킵니다.
* 연구 : 유전자 발현, 유전자 조절 및 단백질 상호 작용 연구.
* 생명 공학 : 신약 및 진단 도구 개발.
DNA 세그먼트를 분리하는 방법의 선택은 특정 응용 분야 및 연구되는 단편의 크기 범위에 따라 다릅니다.
