1. 원리 :
* Biuret 시험은 단백질에서 발견되는 펩티드 결합과 알칼리성 용액에서 구리 이온 (Cu²⁺) 사이의 반응에 의존한다.
* 펩티드 결합은 단백질을 구성하는 아미노산 사이의 연계이다.
* 구리 이온이 펩티드 결합에 결합 할 때, 특정 파장에서 빛을 흡수하여 뚜렷한 색 변화를 생성하는 복합체를 형성합니다.
2. 절차 :
* 테스트 튜브에 소량의 알 수없는 샘플 (액체 또는 고체)을 추가하십시오.
* 샘플에 몇 방울의 Biuret 시약을 추가합니다. Biuret 시약은 구리 황산염 및 수산화 나트륨을 함유하는 용액입니다.
* 테스트 튜브의 내용을 부드럽게 혼합하십시오.
* 색상 변화를 관찰하십시오.
3. 결과 해석 :
* 긍정적 인 결과 : 용액이 바이올렛 또는 자주색으로 변하는 경우 , 그것은 단백질의 존재를 나타냅니다.
* 부정적인 결과 : 용액이 파란색으로 유지되거나 유의 한 색상 변화가없는 경우 단백질이 없음을 시사합니다.
4. 제한 사항 :
* Biuret 시험은 단백질에 특이 적이 지 않으며 펩티드 및 일부 분자와 같은 펩티드 결합을 함유하는 화합물에 대해 양성 결과를 제공 할 수 있습니다.
* 시험은 매우 낮은 농도의 단백질을 감지하기에 충분히 민감하지 않을 수 있습니다.
5. 다른 단백질 검사 :
Biuret 테스트는 널리 사용되지만 다른 단백질 테스트도 사용할 수 있습니다.
* ninhydrin test : 단백질의 빌딩 블록 인 아미노산의 존재를 감지합니다.
* xanthoproteic test : 티로신 및 트립토판과 같은 방향족 아미노산의 존재를 감지합니다.
* Millon의 시험 : 많은 단백질에서 발견되는 아미노산 인 티로신의 존재를 감지합니다.
시험의 선택은 조사중인 특정 단백질과 원하는 수준의 감도에 따라 다릅니다.