등전 초점 (IEF)
당신은 isoelectric foccusing (IEF) 를 언급하고있을 것입니다 , "isoelectophoresis"가 아닙니다. 두 용어 모두 전기 영동이 포함되지만, 그것들은 뚜렷합니다.
* 전기 영동 겔 또는 다른 매체를 통해 전기장을 적용하여 전하 및 크기에 따라 분자를 분리하는 데 사용되는 일반적인 기술입니다.
* 등전 초점 (IEF) 등전점 (PI) 에 기초하여 단백질을 분리하도록 특별히 설계된 특수 유형의 전기 영동입니다. .
등전점 (PI)은 무엇입니까?
단백질의 등전점 (PI)은 단백질이 순 전하를 운반하지 않는 pH입니다. . 이것은 단백질의 양전하와 음전하가 균형을 이룬다는 것을 의미합니다. PI 아래의 pH 값에서, 단백질은 순 양전하를 가지며 음극 (음성 전극)으로 이동한다. 반대로, PI 이상의 pH 값에서, 단백질은 순 음전하를 가지며 양극 (양의 전극)으로 이동할 것이다.
IEF는 어떻게 작동합니까?
IEF는 겔 또는 매체에서 pH 구배를 사용합니다. 단백질 혼합물을 겔에 적용하고 전기장이 적용된다. 단백질은 PI에 해당하는 pH에 도달 할 때까지 겔을 통해 이동합니다. 이 시점에서 그들은 중립이되어 마이그레이션을 중단합니다.
이것은 PI에 따라 단백질을 별개의 밴드로 분리하고, PI가 낮은 단백질은 양극을 향해 더 이동하고 더 높은 PI가 음극을 향해 더 이동하는 단백질을 더 이동시킨다.
IEF 응용 :
IEF는 다음을 포함하여 다양한 응용 프로그램에 사용되는 강력한 기술입니다.
* 단백질 분석 :PI에 기초한 단백질의 확인 및 특성.
* 프로테오믹스 :다른 조건에서 단백질 발현 및 단백질 발현의 변화를 연구한다.
* 생물 의학 연구 :혈액, 소변 및 조직 추출물과 같은 생물학적 샘플에서 단백질 프로파일 분석.
* 식품 과학 :식품에서 단백질을 식별하고 정량화합니다.
* 제약 :약물 발달에서 단백질 순도 및 안정성 분석.
IEF의 장점 :
* 고해상도 :IEF는 높은 수준의 해상도를 제공하여 매우 유사한 PI로 단백질의 분리를 가능하게합니다.
* 감도 :IEF는 저농도의 단백질을 감지 할 수 있습니다.
* 재현성 :이 기술은 매우 재현 가능합니다.
IEF의 단점 :
* 제한된 샘플 크기 :IEF는 비교적 작은 샘플 부피가 필요합니다.
* 기술적 복잡성 :IEF는 효과적으로 수행하기 위해 특수 장비와 전문 지식이 필요합니다.
요약하면, IEF는 PI를 기반으로 단백질을 분리하고 분석하는 귀중한 기술로 다양한 응용 분야에 고해상도와 민감도를 제공합니다.
