DDNTP는 무엇인가 :
* 구조 : DDNTP는 DNA의 빌딩 블록 인 일반 데 옥시 리보 뉴 클레오 사이드 트리 포스페이트 (DNTP)의 변형 된 버전이다. 차이는 데 옥시 리보스 설탕의 3 '하이드 록실 그룹에있다. DDNTP에서,이 하이드 록실 그룹은 수소 원자로 대체된다.
* 기능 : 이 작은 변화는 큰 영향을 미칩니다. 3 '하이드 록실기는 DNA 폴리머 라제가 사슬에 다음 뉴클레오티드를 첨가하는 데 필수적이다. 그것 없이는 DNA 폴리머 라제는 포스 포 디에스테르 결합을 생성 할 수 없으며 체인은 종료됩니다.
시퀀싱에 DDNTP가 사용되는 방법 :
1. DNA 복제 : 시퀀싱 반응은 템플릿 DNA 가닥 및 프라이머로 시작합니다.
2. ddntp Incorporation : DNA 폴리머 라제는 성장하는 체인에 DNTP를 추가하여 템플릿 가닥을 복사합니다. 그러나, 반응은 또한 소량의 DDNTP를 함유하며, 특히 염기 (A, C, G 또는 T)에 따라 상이한 형광 염료로 표지된다.
3. 사슬 종료 : DDNTP가 성장 사슬에 통합 될 때, DNA 폴리머 라제는 다른 뉴클레오티드를 첨가 할 수 없기 때문에 사슬을 종료합니다. 이것은 다양한 길이의 일련의 DNA 단편을 생성하며, 각각은 특정 DDNTP로 끝납니다.
4. 분리 및 탐지 : 이어서, 단편은 전기 영동을 사용하여 크기로 분리되며, 짧은 조각은 겔을 통해 더 빠르게 움직입니다. 단편이 검출기를 통과함에 따라, 각 단편의 끝에서 DDNTP에 부착 된 형광 염료가 확인되어 DNA의 서열이 나타납니다.
요약 :
* DDNTP는 Sanger 시퀀싱의 체인 터미네이터이며, DNA 복제 동안 "정지 지점"으로 작용합니다.
* 형광 염료로 표시되어 표시된베이스를 식별합니다.
*이를 통해 과학자들은 종료 된 조각의 다른 길이를 분석하여 DNA 서열을 읽을 수 있습니다.
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