1. 가수 분해 및 크로마토 그래피 :
* 절차 :
* DNA는 유기체에서 추출됩니다.
* DNA는 개별 뉴클레오티드 (아데닌, 구아닌, 시토신 및 티민)로 가수 분해 (분해)됩니다.
* 뉴클레오티드는 상이한 화학적 특성에 기초하여 크로마토 그래피 (예를 들어, 고성능 액체 크로마토 그래피, HPLC)를 사용하여 분리된다.
* 각 뉴클레오티드의 양은 일반적으로 분광 광도계를 사용하여 정량화됩니다.
* 장점 : 이 방법은 정확하고 신뢰할 수 있으며 각 기반에 대한 정량적 데이터를 제공합니다.
* 단점 : 더 시간이 많이 걸리고 노동 집약적 인 과정입니다.
2. 분광 광도계 :
* 절차 :
* DNA는 유기체로부터 추출되어 완충액에 용해된다.
* 용액의 흡광도는 분광 광도계를 사용하여 특정 파장에서 측정됩니다.
* 흡광도 값은 각 뉴클레오티드에 대해 알려진 멸종 계수를 사용하여 각 염기의 농도를 계산하는 데 사용됩니다.
* 장점 : 이 방법은 크로마토 그래피보다 빠르고 간단합니다.
* 단점 : 크로마토 그래피보다 정확하지 않으며 계산은 항상 사실이 아닌 가정을 기반으로합니다.
3. 용융 온도 (TM) 분석 :
* 절차 :
* DNA의 용융 온도 (TM)는 DNA 가닥의 절반이 변성 (분리)되는 온도입니다.
* TM은 DNA의 염기성 조성에 의해 영향을 받고, 더 높은 GC 함량은 더 높은 TM으로 이어진다.
* DNA 샘플의 TM은 분광 광도계를 사용하여 측정됩니다.
* GC 컨텐츠는 측정 된 TM에 따라 추정 할 수 있습니다.
* 장점 : 이 방법은 비교적 간단하며 개별 염기를 분리하지 않고 GC 컨텐츠를 추정하는 데 사용할 수 있습니다.
* 단점 : 정확한 기본 구성을 결정하는 것은 다른 방법만큼 정확하지 않습니다.
4. 고 처리량 시퀀싱 :
* 절차 :
* DNA는 차세대 시퀀싱 기술을 사용하여 시퀀싱됩니다.
* 시퀀스 데이터를 분석하여 각 염기의 주파수를 결정합니다.
* 장점 : 이 방법은 매우 정확하고 다량의 DNA를 분석 할 수 있으며 게놈의 다른 영역에 걸쳐 기본 조성의 변화를 식별하는 데 사용할 수 있습니다.
* 단점 : 이 방법은 비용이 많이들 수 있으며 전문 장비와 전문 지식이 필요합니다.
5. 기타 방법 :
* 유세포 분석법 : 이 방법은 특정 염기에 결합하는 형광 염료를 사용하여 DNA의 기본 조성을 측정 할 수 있습니다.
* 질량 분석법 : 이 방법은 DNA에서 개별 뉴클레오티드를 식별하고 정량화하는 데 사용될 수 있으며, 기본 조성에 대한 자세한 정보를 제공합니다.
기본 구성을 측정하는 데 가장 적합한 방법은 특정 연구 질문, 이용 가능한 자원 및 원하는 수준의 정확도에 따라 다릅니다.
