기본 재료 :
* 버퍼 : 이들은 추출 혼합물의 pH를 유지하고 종종 열린 세포를 파괴하고 DNA를 보호하는 데 도움이되는 염을 함유하는 용액이다. 일반적인 완충제는 Tris-HCL, EDTA 및 나트륨 도데 실 설페이트 (SDS)를 포함한다.
* 세제 : 이들은 세포막을 분해하여 DNA를 방출한다. 일반적인 세제에는 SDS 및 Triton X-100이 포함됩니다.
* 효소 :
* 프로테아제 : 이들은 DNA에 결합 된 단백질을 분해합니다. 일반적인 프로테아제에는 단백질 제 K 및 트립신이 포함됩니다.
* rnases : 이들은 DNA 샘플을 오염시킬 수있는 RNA를 분해합니다.
* 에탄올 또는 이소프로판올 : 이들은 DNA를 용액에서 벗어나는 데 사용됩니다.
* 소금 : DNA의 강수량을 촉진하는 데 사용됩니다.
* 물 : DNA를 재수 화하고 용해시키는 데 사용됩니다.
특정 방법에 대한 추가 재료 :
* 페놀 클로로포름 : 이 혼합물은 다른 세포 성분과 DNA를 분리하는 데 사용됩니다.
* 자기 구슬 : 이들은 자기 비드 기반 DNA 추출 방법에 사용됩니다.
* 스핀 컬럼 : 이들은 컬럼 기반 DNA 추출 방법에 사용되며, 여기서 DNA는 크기 또는 전하에 의해 다른 세포 성분으로부터 분리된다.
* 키트 : 많은 상업용 DNA 추출 키트를 사용할 수 있으며, 이는 공정을 단순화하고 특정 응용 분야에 최적의 시약을 제공합니다.
전형적인 DNA 추출 프로토콜의 예 :
1. 샘플 준비 : 공급원 재료 (예 :혈액, 조직, 식물)를 수집하여 용해를 위해 준비합니다.
2. 세포 용해 : 세포는 세제 및 효소를 함유하는 용해 완충액을 사용하여 개방된다.
3. 단백질 제거 : 프로테아제는 DNA에 결합 된 단백질을 분해하기 위해 첨가된다.
4. RNA 제거 : RNA를 분해하기 위해 RNases가 첨가된다.
5. DNA 침전 : 에탄올 또는 이소프로판올을 첨가하여 DNA를 용액에서 침전시킨다.
6. DNA 세척 : 침전 된 DNA를 에탄올 또는 이소프로판올로 세척하여 남은 불순물을 제거 하였다.
7. DNA 재수 화 : DNA는 완충액 또는 물에서 재수 화된다.
주목하는 것이 중요합니다 :
* 사용 된 특정 재료 및 기술은 샘플 유형과 의도 된 응용 프로그램에 따라 다릅니다.
* 추출 된 DNA의 품질과 양을 보장하려면 올바른 방법을 선택하는 것이 필수적입니다.
* 화학 물질 및 생물학적 물질로 작업 할 때는 항상 안전 예방 조치를 따라야합니다.
이것은 DNA 추출 물질에 대한 일반적인 개요입니다. 과정에 대한 구체적인 세부 사항은 실험실 및 추출되는 DNA 유형에 따라 다를 수 있습니다.
