재조합 DNA가 어떻게 전달되는지는 다음과 같습니다.
1. 벡터 선택 : 벡터는 재조합 DNA를 숙주 세포로 전달하는 캐리어입니다. 일반적인 벡터는 다음과 같습니다.
* 플라스미드 : 박테리아에서 자연적으로 발견 된 DNA의 원형 조각.
* 박테리오파지 : 박테리아를 감염시키는 바이러스.
* 바이러스 : RDNA를 진핵 세포 (동물 또는 식물 세포와 같은)로 운반하도록 변형 될 수 있습니다.
* 코스 미드 : 플라스미드 및 박테리오파지의 특징을 결합한 하이브리드 벡터.
2. rDNA를 벡터로 삽입 : 원하는 유전자 (RDNA)는 특정 효소를 사용하여 벡터에 삽입된다.
* 제한 효소 : 특정 서열에서 DNA를 자르고 조각 결합을위한 "끈적 끈적한 끝"을 만듭니다.
* 리가 제 효소 : RDNA와 벡터 DNA의 끈적 끈적한 끝에 합류하여 재조합 분자를 형성합니다.
3. 변형 또는 형질 감염 : 재조합 벡터는 숙주 셀에 도입된다.
* 변형 : 박테리아가 환경에서 외래 DNA를 차지하는 과정.
* 형질 감염 : 전기 천공, 리포 션 또는 바이러스 형질 도입과 같은 기술을 사용하여 진핵 세포에 외래 DNA를 도입하는 과정.
4. 선택 및 증폭 : 재조합 벡터를 성공적으로 복용 한 세포는 특정 마커 (예를 들어, 항생제 내성 유전자)를 사용하여 선택됩니다. 그런 다음 이들 세포는 배양에서 성장하여 RDNA를 증폭시킨다.
전달 방법의 예 :
* 전기 천공 : 간단한 전기 펄스가 세포막에 적용되어 재조합 DNA의 유입을 허용하는 임시 기공을 만듭니다.
* lipofection : 재조합 DNA는 지질 소포에 캡슐화되어 세포막과 융합하여 DNA를 세포질로 전달한다.
* 바이러스 성 변환 : 재조합 DNA는 바이러스로 포장되어 숙주 세포를 감염시키고 DNA를 전달합니다.
주요 고려 사항 :
* 효율성 : 전달 프로세스의 효율은 벡터, 호스트 셀 및 사용 된 방법에 따라 달라질 수 있습니다.
* 특이성 : 재조합 DNA가 올바르게 발현되도록 표적 세포 유형을 신중하게 선택해야합니다.
* 안전 : RDNA가 다른 유기체로 퍼지거나 의도하지 않은 결과를 초래할 가능성에 대한 우려가 있습니다.
요약하면, 재조합 DNA의 전달은 적합한 벡터를 선택하고, rDNA를 벡터에 삽입하고, 재조합 벡터를 숙주 셀에 도입하고, RDNA를 함유하는 세포를 선택하고 증폭시키는 복잡한 과정이다. 이러한 기술은 의학, 농업 및 연구에 적용하는 데 필수적입니다.
