* 체인 종료 시퀀싱 (Sanger Sequencing) : 이 방법은 3'- 하이드 록실기가없는 변형 된 염기 인 Dideoxynucleotides (DDNTP)에 의존한다. 성장하는 DNA 가닥에 통합 될 때, DDNTP는 추가의 신장을 방지하여 다양한 길이의 조각을 생성합니다. 각각의 DDNTP에는 상이한 형광 염료가 표시되어 말단 염기 및 후속 서열 어셈블리를 식별 할 수있다.
* 차세대 시퀀싱 (NGS) : 많은 NGS 기술도 수정 된 염기를 사용합니다. 예를 들어, 가역적 종말기 시퀀싱은 형광 표지와 3 '말단에서 차단 그룹을 갖는 뉴클레오티드를 포함한다. 통합 후, 라벨을 읽고, 차단 그룹을 제거하고, 사이클이 반복된다. 이것은 전체 DNA 분자의 순차적 시퀀싱을 허용한다.
요약하면, 수정 된 염기는 다음에 필수적입니다.
* 종단 DNA 합성 : NGS 방법의 Sanger 시퀀싱 및 차단 그룹의 DDNTP는 특정 뉴클레오티드에서의 신장 공정을 중지합니다.
* 라벨링 및 식별 : 변형 된 염기에 부착 된 형광 라벨은 시퀀싱 공정 동안 개별 뉴클레오티드의 검출 및 분화를 가능하게한다.
DNA 시퀀싱에서 변형 된 염기를 사용하는 주요 장점은 다음과 같습니다.
* 개선 된 정확도 : 변형 된 염기는 뉴클레오티드의보다 정확한 식별을 허용합니다.
* 처리량 증가 : 변형 된 염기를 이용한 NGS 기술은 수백만 또는 수십억의 DNA 단편의 고 처리량 시퀀싱을 동시에 가능하게합니다.
* 비용 절감 : 변형 된 염기의 사용으로 인해 DNA 시퀀싱 비용이 크게 줄어들어 연구 및 임상 적용에 더 접근 할 수 있습니다.
이러한 변형 된 염기를 사용함으로써 DNA 시퀀싱 기술은 유전학에 대한 우리의 이해에 혁명을 일으켰으며 의학, 생명 공학 및 기타 분야의 발전을위한 길을 열었습니다.