주요 차이 정상적인 상과 역상 크로마토 그래피 사이에서 정상 상 크로마토 그래피는 매우 극성 고정 상 및 A 를 갖는다는 것입니다. 비극성 역상 크로마토 그래피는 모바일 상이 A 를 갖는다 비극성 고정 상 및 극성 이동상. 또한, 정상 상 크로마토 그래피의 고정상은 주로 순수한 실리카이며, 이동상은 클로로포름과 같은 비-수성 용매 인 반면 역상 크로마토 그래피의 고정상은 긴 소수성 긴 체인을 갖는 변형 된 실리카 기질이며, 이동상은 주로 물, 메탄올 또는 아세토 니트릴이다.
정상 및 역상 크로마토 그래피는 고압 하에서 작동하는 두 가지 유형의 HPLC (고성능 액체 크로마토 그래피) 방법입니다. 일반적으로 일반 액체 크로마토 그래피와 비교할 때 해상도 전력이 더 높습니다.
주요 영역을 다루었습니다
1. 정상적인 위상 크로마토 그래피
- 정의, 프로세스, 중요성
2. 역상 크로마토 그래피
- 정의, 프로세스, 중요성
3. 정상 상과 역상 크로마토 그래피의 유사점은 무엇입니까
- 일반적인 기능의 개요
4. 정상 상과 역상 크로마토 그래피의 차이점은 무엇입니까
- 주요 차이점 비교
주요 용어
HPLC, 액체 크로마토 그래피, 이동 상, 정상 상 크로마토 그래피, 역상 크로마토 그래피, 고정 상
정상 위상 크로마토 그래피
정상 위상 크로마토 그래피는 HPLC 기술의 한 유형입니다. 극성 실리카 인 흡수성에 대한 상호 작용 정도에 따라 분석 물을 분리합니다. 따라서, 이러한 유형의 크로마토 그래피의 고정기는 친수성이다. 또한 샘플 혼합물에서 친수성 분자와 친수성 상호 작용을 만들 수 있습니다. 일반적으로, 이들 상호 작용에는 수소 결합, 쌍극자-쌍극자 상호 작용 등이 포함됩니다. 따라서 더 많은 비극성 분석 물은 고정 단계에서 더 오래 머무르고 보유 시간이 증가합니다.
그림 1 :정상 위상 및 역상 크로마토 그래피 - 특성
또한, 정상적인 위상 크로마토 그래피의 이동상은 비극성 및 비-퀴즈입니다. 따라서, 혼합물의 비극성 또는 소수성 분석 체는 공정의 시작 부분에서 이동상과 효과적으로 세척한다. 한편, 분석 물의 보유 시간은 이동상의 극성이 증가함에 따라 감소합니다. 또한, 보유 시간의 열악한 재현성은 정상 상 크로마토 그래피의 주요 단점이다. 기본적으로, 이것은 실리카 표면에 물의 층 또는 protic 유기 용매의 존재로 인해 발생합니다. 그러나 이것은 역상 크로마토 그래피에서 제거됩니다.
역상 크로마토 그래피
역상 크로마토 그래피는 최근 HPLC의 한 유형입니다. 정상적인 상 크로마토 그래피와 비교할 때 보유 시간의 재현성이 증가합니다. 기본적으로, 이러한 재현성의 증가는 정지상 위상을 비극성으로 만들어 달성합니다. 이를 위해, 실리카 고정상의 표면은 RME2SICL로 변형되며, 여기서 R은 C18H37 또는 C8H17과 같은 직선형 알킬기이다. 그러나, 고정상의 비극성 특성으로 인해, 샘플 혼합물에서 덜 극성 분석 물질은 정상 상 크로마토 그래피와 대조적으로 더 높은 체류 시간을 갖는 경향이있다.
그림 2 :역상 크로마토 그래피 - 용리
또한 이동상에 더 많은 물을 추가하여 유지 시간을 증가시킬 수 있으며, 이는 비극성 분석 물과 고정기 사이의 소수성 상호 작용을 증가시킵니다. 또한, 역상 크로마토 그래피의 이동상은 극성이며, 샘플 혼합물에서 극성 분석 물을 세척한다. 이것은 샘플 혼합물에서 비극성 분석 물의 분리를 용이하게한다. 또한, 이동상의 표면 장력과 그 pH는 체류 시간에 영향을 미칩니다.
정상 상과 역상 크로마토 그래피 사이의 유사성
- 정상 및 역상 크로마토 그래피는 HPLC의 두 가지 크로마토 그래피 기술의 두 가지 유형입니다.
- 회로도에는 degasser, 샘플러, 펌프 및 감지기가 포함됩니다.
- 둘 다 고압에서 작동합니다.
- 일반 열 크기는 직경이 2.1–4.6 mm이고 길이가 30–250 mm입니다.
- 소량의 샘플을 분리합니다.
- 분리는 샘플의 구성 요소의 상호 작용도 흡착 입자와의 상호 작용을 기반으로합니다. 이러한 상호 작용은 온도에 따라 다릅니다.
- 작은 흡착제 입자 (평균 입자 크기의 2–50 μm)는 두 가지 유형의 크로마토 그래피에 고해상도 전력을 제공합니다.
- 두 유형의 크로마토 그래피는 샘플 구성 요소의 정량적 분석을 제공합니다.
- 샘플 당 약 2-60 분이 걸리지 만 병렬 분석을 허용하지 않습니다.
- 크로마토 그래피의 보유 시간은 컬럼과의 상호 작용을 증가시켜 증가 할 수 있습니다.
- 분석 물을 고정 위상의 극성과 더 유사하게 만들어 분석 물을 용출 할 수 있습니다.
정상 위상과 역상 크로마토 그래피의 차이
정의
정상 위상 크로마토 그래피는 두 상 사이의 혼합물의 구성 요소의 분포를 허용하는 분리 방법을 나타냅니다. 그 중 하나는 극성 고정 위상이지만 이동상은 비극성입니다. 대조적으로, 역상 크로마토 그래피는 분리 방법을 지칭하며, 그 이동상은 고정기보다 극성이 더 많다.
진화
정상 상 크로마토 그래피는 1970 년대에 액체 크로마토 그래피 형태로 진화되었습니다. 그러나 역상 크로마토 그래피는 최근에 진화 된 HPLC 형태입니다.
고정 상
또한, 정상 위상 크로마토 그래피는 주로 순수한 실리카 인 극성 고정 상을 사용하는 반면, 역상 크로마토 그래피는 비극성 고정 상을 사용하는 반면, 긴 소수성 긴 사슬을 갖는 변형 된 실리카 기판입니다.
이동 단계
정상 위상 크로마토 그래피는 비극성 비-퀴어스 용매를 이동상으로 사용하는 반면 역상 크로마토 그래피는 주로 물, 메탄올 또는 아세토 니트릴 인 극성 이동상을 사용합니다.
분리 유형
또한, 정상 위상 크로마토 그래피는 컬럼에서 높은 유지 시간으로 극성 분석 물을 분리하는 반면, 역상 크로마토 그래피는 덜 극성 분석 물을 분리하여 컬럼에서 높은 유지 시간을 갖는다.
이동 단계에서의 분석
정상적인 위상 크로마토 그래피에서 이동상은 분리의 시작시 비극성 분석 물을 전달하는 동안 역상 크로마토 그래피에서 이동상은 극성 분석 물을 운반합니다.
체류 시간 증가
비극성 이동상은 정상 상 크로마토 그래피의 체류 시간을 증가시키는 반면, 극하 이동상은 역상 크로마토 그래피의 체류 시간을 증가시킵니다.
용리
분석 물은 정상 상 크로마토 그래피에서 이동상의 극성을 증가시켜 용리 될 수 있으며, 역상 크로마토 그래피에서 이동 상의 극성을 감소시킴으로써 분석 물을 용출 할 수 있습니다.
고정 상 특성
정상 위상 크로마토 그래피의 고정 단계에는 물 또는 프로 테릭 유기 용매 층이 포함되어 반대 상 크로마토 그래피의 고정상은 물 또는 프로티틱 용매 층을 함유하지 않습니다.
보유 시간의 재현성
또한, 정상 위상 크로마토 그래피는 체류 시간의 재현성이 좋지 않지만 역상 크로마토 그래피는 보유 시간의 재현성이 높습니다.
열 손상
정상 위상 크로마토 그래피의 열은 손상되기 쉽지만 역상 크로마토 그래피의 컬럼은 손상하기 어렵습니다.
결론
정상 위상 크로마토 그래피는 극성 고정 단계와 비극성 이동 상을 사용하는 HPLC의 유형입니다. 이의 결과로, 혼합물의 비극성 분석 체는 컬럼 밖으로 쉽게 이동하면서 고정상의 흡수성에 대한 상호 작용 정도에 기초하여 극성 분석 물의 분리를 허용한다. 반면, 역상 크로마토 그래피는 비극성 고정 상 및 극성 이동상을 사용하는 최근의 HPLC의 유형입니다. 따라서, 극성 분석 물은 이동상과 함께 컬럼 밖으로 이동하여 고정상과의 상호 작용 정도에 기초하여 비극성 분석 물의 분리를 허용한다. 따라서 정상 및 역상 크로마토 그래피의 주요 차이점은 고정 및 이동성 유형입니다.
