재료 :
1. 탈 이온수
2. 칼륨 디 하이드로 겐 포스페이트 (KH2PO4)
3. 인산 나트륨 (NA2HPO4)
4. pH 미터
5. 자기 교반기 또는 교반 막대
6. 부피 플라스크 (예 :1000 ml)
7. 졸업 된 실린더 또는 피펫
시약 :
1.
2.
절차 :
1. pH 7.5에서 1000 mL의 0.1 m 포스페이트 완충제를 제조하는 데 필요한 0.2 m KH2PO4 및 0.2 M NA2HPO4 용액의 부피를 계산하십시오. Henderson-Hasselbalch 방정식을 사용하십시오.
pH =pka + log ([a-]/[ha])
어디:
-PH는 원하는 pH (7.5)입니다.
-PKA는 인산의 해리 상수입니다 (7.21)
- [A-]는 컨쥬 게이트 염기의 농도입니다 (NA2HPO4)
- [ha]는 약산의 농도입니다 (KH2PO4)
방정식을 재 배열하고 값을 대체합니다.
log ([a -]/[ha]) =ph -pka =7.5-7.21 =0.29
[a-]/[ha] =antilog (0.29) =1.959
원하는 완충액 농도 (0.1 m) 및 계산 된 비율 ([a-]/[ha])로부터 0.2 m KH2PO4 및 0.2 M NA2HPO4 용액의 부피를 결정합니다.
v (kh2po4) =[ha] / [총 농도] * 총 부피
=0.1 m / (0.1 m + 0.1 m) * 1000 ml
=500 ml
v (na2hpo4) =[a-] / [총 농도] * 총 부피
=0.1 m / (0.1 m + 0.1 m) * 1000 ml
=500 ml
2. 500 mL의 0.2 m KH2PO4 용액을 1000 mL 부피 플라스크로 옮깁니다.
3. 부피 플라스크에 500 ml의 0.2 m Na2HPO4 용액을 첨가하십시오.
4. 플라스크를 부드럽게 소용돌이 치고 용액을 혼합하십시오.
5. pH 미터를 사용하여 완충액의 pH를 점검하십시오. 필요에 따라 0.2 M kH2PO4 또는 0.2 M NA2HPO4 용액의 소량을 추가하여 pH를 7.5로 조정하십시오.
6. 필요한 경우, 버퍼의 최종 부피를 최대 1000ml로 가져 오기 위해 탈 이온수를 넣습니다.
7. 자기 교반기 또는 교반 막대를 사용하여 버퍼를 철저히 섞습니다.
pH 7.5의 0.1m 인산염 완충액이 이제 사용할 준비가되었습니다. 실험 조건에 맞게 버퍼를 적절한 온도로 보관하십시오.
