1. Biuret 테스트 :
* 원리 : 이 시험은 단백질에서 아미노산 사이의 연계 인 펩티드 결합의 존재를 감지한다.
* 절차 :
* 샘플에 몇 방울의 Biuret 시약 (강한 알칼리의 구리 설페이트 용액)을 첨가하십시오.
* 바이올렛 파란색 색상은 단백질의 존재를 확인하여 긍정적 인 결과를 나타냅니다.
* 장점 : 비교적 민감하고 널리 사용됩니다.
* 단점 : 펩티드 결합을 함유하는 다른 화합물이 또한 양성 반응을 보일 수 있기 때문에 단백질에 특이 적이 지 않아도된다.
2. Ninhydrin 테스트 :
* 원리 : 이 시험은 모든 아미노산에 존재하는 α- 아미노기의 존재를 감지한다.
* 절차 :
* Ninhydrin 시약으로 샘플을 가열합니다.
* 보라색 파란색 색상은 긍정적 인 결과를 나타내며, 이는 자유 아미노 그룹의 존재를 나타냅니다.
* 장점 : 매우 민감하고 매우 적은 양의 아미노산을 감지 할 수 있습니다.
* 단점 : α- 아미노 그룹을 함유하는 다른 화합물이 또한 반응 할 수 있기 때문에 단백질에 특이 적이 지 않는다.
3. xanthoproteic 테스트 :
* 원리 : 이 시험은 티로신 및 트립토판과 같은 방향족 아미노산의 존재를 감지합니다.
* 절차 :
* 농축 질산을 샘플에 첨가하십시오.
* 혼합물을 부드럽게 가열하십시오.
* 노란색은 긍정적 인 결과를 나타내며, 방향족 아미노산의 존재를 나타냅니다.
* 암모니아를 첨가하면 색상이 주황색으로 향상됩니다.
* 장점 : 방향족 아미노산을 함유 한 단백질에 비교적 특이 적.
* 단점 : 다른 테스트만큼 민감하지 않습니다.
4. Millon의 시험 :
* 원리 : 이 시험은 방향족 아미노산 인 티로신의 존재를 감지합니다.
* 절차 :
* 샘플에 Millon 's Reagent (질산의 수은 질산염 용액)를 첨가하십시오.
* 혼합물을 부드럽게 가열하십시오.
* 가열시 빨간색으로 변하는 흰색 침전물은 긍정적 인 결과를 나타내며 티로신의 존재를 확인합니다.
* 장점 : 단백질의 일반적인 아미노산 인 티로신에 대해 비교적 특이 적.
* 단점 : 다른 테스트만큼 민감하지 않습니다.
5. 브래드 포드 분석 :
* 원리 : 이것은 단백질에 결합하는 염료를 사용하여 샘플의 단백질 농도를 측정하는 비색 분석법입니다.
* 절차 :
* Coomassie Brilliant Blue Dye와 샘플을 혼합하십시오.
* 염료는 단백질에 결합하여 분광 광도계를 사용하여 측정 할 수있는 색 변화를 초래합니다.
* 장점 : 단백질 정량화에 매우 민감하고 정확하며 널리 사용됩니다.
* 단점 : 분광 광도계가 필요하며 특정 세제의 영향을받을 수 있습니다.
올바른 테스트 선택 :
특정 상황에 대한 최상의 테스트는 다음과 같은 요소에 따라 다릅니다.
* 감도 : 샘플에서 얼마나 많은 단백질이 예상됩니까?
* 특이성 : 특정 유형의 단백질이나 단백질 만 감지해야합니까?
* 자원 : 필요한 시약과 장비에 접근 할 수 있습니까?
단백질의 존재를 확인하고 구성을보다 완전하게 이해하기 위해 여러 테스트를 사용하는 것이 좋습니다.
