1. 소수성 상호 작용 :
* 단백질은 전형적으로 물 분자와 수소 결합을 형성하는 친수성 (물을 좋아하는) 그룹으로 인해 물에 용해됩니다.
* 그러나 그들은 또한 모여 들리는 경향이있는 소수성 (물을 먹는) 그룹을 포함합니다.
2. 황산 암모늄의 영향 :
* 황산 암모늄을 단백질 용액에 첨가하면 물 분자와 상호 작용하여 단백질의 친수성 그룹으로부터 효과적으로 벗겨냅니다.
* 단백질 주위의 수화 쉘의 이러한 파괴는 소수성 그룹을 노출시킵니다.
3. 집계 및 강수량 :
* 황산 암모늄의 농도가 증가함에 따라, 상이한 단백질 분자의 소수성 그룹이 더 노출되고 서로 상호 작용하여 응집이 발생한다.
* 결국, 이러한 골재는 불용성이되어 용액에서 벗어날 수있을 정도로 커질 정도로 커집니다.
강수에 영향을 미치는 요인 :
* 단백질 농도 : 단백질 농도가 높을수록 침전을 위해 더 높은 황산 암모늄 농도가 필요합니다.
* 단백질 유형 : 단백질은 다양한 정도의 소수성을 가지며, 황산 암모늄 침전에 대한 감도가 상이합니다.
* pH : 용액의 pH는 단백질의 전하 및 황산 암모늄과의 상호 작용에 영향을 줄 수있다.
* 온도 : 더 높은 온도는 일반적으로 단백질 용해도를 향상시켜 침전을 위해 더 높은 황산 암모늄 농도가 필요합니다.
황산 암모늄 침전물의 적용 :
* 단백질 정제 : 복잡한 혼합물로부터 단백질을 집중시키고 부분적으로 정제하는 일반적인 기술입니다.
* 결정화 : 황산 암모늄은 단백질 결정화를 촉진하는 데 사용될 수 있으며, 이는 구조적 연구에 중요합니다.
황산 암모늄 사용의 장점 :
* 비교적 저렴하고 쉽게 구할 수 있습니다.
* 일반적으로 단백질에 대한 비 변성은 자연 구조를 파괴하지 않음을 의미합니다.
* 단백질 특성에 기초한 선택적 강수량을 허용합니다.
고려 사항 :
* 각 특정 단백질 및 원하는 결과에 대한 황산 암모늄을 최적화하는 것이 중요합니다.
* 침전물은 표적 단백질 외에 다른 분자를 함유 할 수 있으며, 추가 정제 단계가 필요합니다.
* 일부 단백질은 높은 염 농도에 민감 할 수 있습니다.
결론적으로, 암모늄 황산염 침전은 소수성 상호 작용의 차이와 고 염 농도의 존재하에 용해도를 이용하여 단백질을 분리하고 정제하는 데 유용한 기술입니다. .