1. 고정 단계 :
* 고체 입자 : 고정상은 컬럼에 포장 된 작은 고체 입자로 구성됩니다. 이들 입자는 각각 다른 특성을 갖는 실리카 겔, 알루미나 또는 기타 재료 일 수있다.
* 흡착 : 고정 상 입자는 극성, 크기 또는 전하와 같은 특성을 기반으로 분자를 끌어 들이고 잡을 수있는 표면이 있습니다. 이 매력을 흡착이라고합니다.
2. 이동 단계 :
* 액체 또는 가스 : 이동상은 컬럼을 통해 흐르는 액체 또는 가스로 분리 될 화합물의 혼합물을 운반합니다.
* 용리 : 이동 상이 컬럼을 통해 흐르면 고정 상에 흡착 된 화합물과 상호 작용합니다. 정지상에 대한 친화력이 약한 화합물은 이동 단계에 의해 "용리"(씻겨지고) 컬럼을 통해 더 빨리 이동합니다.
3. 분리 :
* 다른 친화력 : 고정 단계에 대해 다른 친화력을 갖는 화합물은 기둥을 통해 다른 속도로 이동합니다. 고정 단계에 대한 친화력이 더 강한 사람들은 더 느리게 움직일 것이며 친화력이 약한 사람들은 더 빨리 움직입니다. 이것은 정지상과의 상호 작용에 기초하여 화합물의 분리를 생성한다.
4. 탐지 :
* 분수 : 화합물이 컬럼에서 용리함에 따라, 분수라는 별도의 용기로 수집 할 수 있습니다. 이 분획은 분리 된 화합물을 식별하기 위해 분석 될 수있다.
예 :
빨간색, 파란색 및 녹색 염료가 혼합되어 있다고 상상해보십시오. 컬럼 크로마토 그래피를 사용하여 분리 할 수 있습니다.
* 고정 단계 : 극성 인 실리카 겔.
* 이동 단계 : 헥산과 같은 비극성 용매.
* 분리 : 적색 염료는 가장 비극성이 아니므로 실리카 겔에 가장 약한 친화력이 있고 먼저 eLutes가 있습니다. 파란색 염료는 약간 더 많은 극성이며 두 번째로 들어갑니다. 녹색 염료는 가장 극성이며 마지막으로 eLutes입니다.
입자 크로마토 그래피의 유형 :
* 정상 상 크로마토 그래피 : 고정상은 극성이며 이동상은 극성이 적습니다.
* 역상 크로마토 그래피 : 고정상은 비극성이며 이동상은 더 극성입니다.
입자 크로마토 그래피의 주요 장점 :
* 고해상도 : 입자는 상호 작용을위한 넓은 표면적을 제공하여 고해상도 분리를 가능하게합니다.
* 다양성 : 화합물의 특성에 따라 분리를 최적화하기 위해 다른 고정 및 이동성 단계를 선택할 수 있습니다.
* 와이드 적용 : 입자 크로마토 그래피는 분석 화학, 생화학 및 제약에 널리 사용됩니다.
전반적으로 입자를 사용한 크로마토 그래피는 분자의 고체 고정 상 및 흐름 이동 상과 분자의 상이한 상호 작용을 활용하여 분리 및 분석을 달성합니다.
