실험 :과산화수소 및 시금치 잎 추출물의 효소 반응에 대한 pH의 영향
소개 :
이 실험은 시금치 잎에서 발견되는 효소 인 카탈라아제에 의한 과산화수소 (HATE)의 효소 분해에 대한 pH의 효과를 탐구한다. 카탈라제는 산화 손상으로부터 세포를 보호하는 데 필수적인 반응 인 물 (HATER) 및 산소 (O₂)로의 HATER의 분해를 가속화한다.
재료 :
* 시금치 잎 (신선 또는 냉동)
* 블렌더 또는 박격포 및 유봉
* 치즈 클로스 또는 커피 필터
* 테스트 튜브 (5 이상)
* 졸업 된 실린더
* 비커
* 과산화수소 (3%)
* pH 완충액 (pH 4, 6, 8, 10)
* 드롭퍼 또는 피펫
* 스톱워치
* 온도계
절차 :
1. 시금치 추출물 준비 :
* 시금치 잎을 철저히 씻으십시오.
* 잎과 소량의 증류수로 잎을 섞거나 갈아서 두꺼운 슬러리를 만듭니다.
* 치즈 천사 또는 커피 필터를 통해 슬러리를 필터링하여 녹색 추출물을 얻습니다.
2. 버퍼 솔루션 준비 :
* 상업적으로 이용 가능한 pH 완충액을 사용하거나 적절한 화학 물질 및 절차를 사용하여 직접 준비하십시오.
3. 테스트 튜브 설정 :
* 5 개의 테스트 튜브 (1-5) 라벨을 붙이고 각각에 5ml를 추가하십시오.
* 튜브 1 :pH 4 버퍼 용액
* 튜브 2 :pH 6 완충액
* 튜브 3 :pH 8 버퍼 용액
* 튜브 4 :pH 10 완충액
* 튜브 5 :증류수 (제어)
4. 시금치 추출물을 추가하십시오 :
* 각 시험관에 1ml의 시금치 추출물을 첨가하십시오.
5. 과산화수소를 첨가 :
* 드롭퍼 또는 피펫을 사용하여 각 시험관에 1 ml의 3% 과산화수소 1 ml를 동시에 첨가하십시오.
6. 데이터를 관찰하고 기록하십시오 :
* 과산화수소를 첨가 한 직후에 스톱워치를 시작하십시오.
* 각 시험관에서 생성 된 기포 (산소 가스)의 양을 관찰하십시오.
* 특정 양의 기포 (예 :5 개의 기포)를 생성하기 위해 각 테스트 튜브에 걸리는 시간을 기록하십시오.
* 온도계를 사용하여 각 테스트 튜브의 온도를 기록하십시오.
7. 반복 실험 :
* 결과가 일관되도록하기 위해 1-6 단계를 3 번 이상 반복하십시오.
데이터 분석 :
* 그래프 : 용액의 pH에 대해 특정 양의 기포를 생성하는 데 걸리는 시간을 플로팅하십시오.
* 관찰 : 상이한 pH 수준 사이의 거품 생산 속도의 차이를 분석하십시오.
* 결론 : 과산화수소 분해를 담당하는 효소 인 카탈라제의 활성에 대한 pH의 영향에 대한 결론을 도출한다.
예상 결과 :
카탈라아제는 특정 pH 범위 내에서 가장 활성이며, 일반적으로 pH 7 정도의 pH가 7에 가장 가까운 시험관에서 가장 활발한 버블 링을 관찰해야한다. pH 값이 높거나 낮은 튜브는 반응 속도가 느리다는 것을 나타냅니다.
안전 예방 조치 :
* 과산화수소와 화학 물질을 취급 할 때 적절한 안전 고글과 장갑을 착용하십시오.
* 솔루션을 섭취하거나 흡입하지 마십시오.
* 안전 규정에 따라 화학 물질을 올바르게 폐기하십시오.
추가 탐사 :
* 카탈라아제 활성에 대한 온도의 영향을 조사하십시오.
* 다른 식물 추출물에서 카탈라아제의 활동을 탐색하십시오.
* 카탈라아제의 작용 메커니즘과 생물학적 시스템에서의 역할을 연구하십시오.
이 실험은 생물학적 시스템에서 pH의 중요성과 생화학 적 반응 촉매에서 효소의 역할을 이해하기위한 귀중한 기초를 제공한다.
