1. 원리 :
* 황산 암모늄 (NH₄) ₂ SOA는 매우 가용성 염입니다. 단백질을 함유 한 용액에 첨가하면 용액의 이온 강도를 증가시킨다.
* 이러한 이온 강도의 증가는 물 분자와 단백질 표면 사이의 상호 작용을 방해하여 단백질을 둘러싼 수화 쉘을 약화시킵니다.
* 결과적으로, 단백질 분자는 덜 용해되고 응집되는 경향이있어 침전으로 이어진다. .
2. 실험실 테스트 응용 프로그램 :
* 단백질 정제 : 포화 암모늄 설페이트는 분별 단백질 의 일반적인 방법입니다. 그들의 용해도를 기반으로합니다. 황산 암모늄의 농도를 조심스럽게 조정함으로써, 특정 단백질을 선택적으로 침전시켜 다른 단백질을 용액에 남겨 둡니다. 이것은 추가 분석을 위해 표적 단백질을 정제하는 데 도움이됩니다.
* 효소 활성 : 암모늄 황산염 침전은 효소를 집중 시키거나 안정성을 높이거나 억제제를 제거하는 데 사용될 수 있습니다. 이것은 효소 동역학 및 기능을 연구하는 데 특히 유용합니다.
* 면역 침전 : 이 방법은 항체를 사용하여 복잡한 혼합물로부터 특정 단백질을 포획한다. 황산 암모늄은 항체를 도입하기 전에 혼합물에 첨가되어 부피를 줄이고 표적 단백질의 농도를 증가시켜 면역 침전 공정의 효율을 향상시킬 수있다.
3. 장점과 고려 사항 :
* 비교적 저렴하고 쉽게 구할 수 있습니다 : 황산 암모늄은 단백질 침전을위한 비용 효율적인 시약입니다.
* 단백질의 온화 : 다른 침전 방법과 비교하여, 황산 암모늄은 일반적으로 단백질에 덜 가혹하여 변성의 위험을 감소시킨다.
* 높은 소금 농도 : 효과적이지만 높은 염 농도는 다운 스트림 응용에 영향을 줄 수 있습니다. 최적의 효소 활성 또는 단백질 분석을 위해 제거 또는 조정해야 할 수도 있습니다.
요약 :
포화 암모늄 황산염은 실험실 테스트, 특히 단백질 정제, 효소 활성 연구 및 면역 침전에서 강력한 도구입니다. 그들의 용해도에 기초하여 단백질을 침전시키는 능력은 관심있는 단백질을 분리하고 농축하는 귀중한 방법을 제공한다. 그러나이 기술을 사용할 때 높은 염 농도와 잠재적 인 하류 영향을 인식하는 것이 중요합니다.